羟甲基戊二酰辅酶A合成酶(HMGCS)测试盒_可见分光光度法

羟甲基戊二酰辅酶A合成酶(HMGCS)测试盒_可见分光光度法
测定方法：可见分光光度法
产品规格：50管/48样    
储存条件：低温保存
注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
羟甲基戊二酰辅酶A合成酶是甲羟戊酸代谢途径中的关键酶，催化乙酰CoA与乙酰乙酰CoA生成羟甲基戊二酰CoA。

测定原理：
HMGCS催化乙酰CoA与乙酰乙酰CoA生成羟甲基戊二酰CoA，同时产生CoASH，使DTNB转化为的TNB，在412nm下有特征吸光值。
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：
提取液：60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃避光保存；临用前加入7mL蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃避光保存；临用前加入7mL蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；
试剂三：15mL×1瓶，4℃避光保存。




测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至412nm，蒸馏水调零。
2、在1 mL玻璃比色皿中加入125μL试剂一、125μL试剂二和250μL试剂三，混匀，加入500μL样本上清，迅速混匀后记录412nm下初始吸光值A1和4min后的吸光值A2。计算ΔA＝A2-A1。