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氧化型/脱氢抗坏血酸(DHA)含量测试盒_可见分光光度法

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  • 晶抗生物
  • 10μmol/L
  • JK-R6729
  • 国内
  • 2025年07月15日
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      上海晶抗生物工程有限公司

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      969

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    • 标记物

      详见说明书

    • 适应物种

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    • 应用

      仅供科研研究使用

    • 检测方法

      可见分光光度法

    • 检测范围

      10μmol/L

    产品细节图片1


    氧化型/脱氢抗坏血酸(DHA)含量测试盒_可见分光光度法
    测定方法:可见分光光度法
    产品规格:50管/48样    
    储存条件:低温保存
        意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
    测定意义:
    AsA作为植物细胞一个重要生理指标,其AsA 的含量、氧化还原状态(AsA/DHA 比率)及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。DHAAsA的可逆的氧化型,在生物体内,与抗坏血酸共同组成氧化还原系统,具有电子受体的作用。

    测定原理:
    DTT还原DHA生成AsA,通过测定体系中AsA的生成速率,即可计算出DHA含量。
    自备仪器和用品
    低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。


    产品细节图片2


    试剂组成和配制:
    试剂一:液体50 mL×1瓶,室温保存。
    试剂二:液体40 mL×1瓶,室温保存。
    试剂三:粉剂×1瓶,4保存。临用前加入10mL蒸馏水充分溶解。
    标准品:粉剂×1瓶, 4保存。临用前加入5.743 mL蒸馏水充分溶解;吸取0.1 mL上述溶液,加入0.9 mL蒸馏水,混匀,即为100μmol/L DHA
    DHA测定操作:
    1. 分光光度计预热30 min,调节波长到265 nm,蒸馏水调零。
    2. 试剂二在25℃水浴锅中预热30 min
    3. 标准管:依次在1mL石英比色皿加入100μL标准液、800μL预热的试剂二和100μL试剂三,迅速混匀后于265nm比色,记录10s130s的吸光值A1A2A空白管=A2-A1
    4. 测定管:依次在1mL石英比色皿加入100μL上清液、800μL预热的试剂二和100μL试剂三,迅速混匀后于265nm比色,记录10s130s的吸光值A3A4A测定管=A4-A3
    注意:标准管只需测定一次。
    计算公式
    (1). 按蛋白浓度计算
    DHA(nmol/mg prot) =[C标准液×A测定管÷A标准管×V标准Cpr×V
    =100×A测定管÷A标准管÷Cpr
    (2). 按样本质量计算

    DHA(nmol/g鲜重) =[C标准液×A测定管÷A标准管×V标准]÷(W×V÷V样总)
    =100×A测定管÷A标准管÷W
    (3). 按细胞数量计算
    DHA(nmol/104 cell) =[C标准液×A测定管÷A标准管×V标准]÷(W×V÷V样总)
    =100×A测定管÷A标准管÷细胞数量
    4)按液体体积计算
    DHA(nmol/mL) =[C标准液×A测定管÷A标准管×V标准]÷V
    =100×A测定管÷A标准管
    C标准液:100μmol/LV标准:加入反应体系中标准液体积0.1mLV样总:上清液总体积,1.0 mL=0.001 LV样:加入反应体系中上清液体积,0.1mLW:样品质量g

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