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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存:
969
- 样本:
来电咨询
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
来电咨询
- 应用:
仅供科研研究使用
- 检测方法:
可见分光光度法
- 检测范围:
10μmol/L
氧化型/脱氢抗坏血酸(DHA)含量测试盒_可见分光光度法
测定方法:可见分光光度法
产品规格:50管/48样
储存条件:低温保存
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
AsA作为植物细胞一个重要生理指标,其AsA 的含量、氧化还原状态(AsA/DHA 比率)及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。DHA是AsA的可逆的氧化型,在生物体内,与抗坏血酸共同组成氧化还原系统,具有电子受体的作用。
测定原理:
DTT还原DHA生成AsA,通过测定体系中AsA的生成速率,即可计算出DHA含量。
自备仪器和用品:
低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体50 mL×1瓶,室温保存。
试剂二:液体40 mL×1瓶,室温保存。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入10mL蒸馏水充分溶解。
标准品:粉剂×1瓶, 4℃保存。临用前加入5.743 mL蒸馏水充分溶解;吸取0.1 mL上述溶液,加入0.9 mL蒸馏水,混匀,即为100μmol/L DHA。
DHA测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到265 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴锅中预热30 min。
3. 标准管:依次在1mL石英比色皿加入100μL标准液、800μL预热的试剂二和100μL试剂三,迅速混匀后于265nm比色,记录10s和130s的吸光值A1和A2,△A空白管=A2-A1。
4. 测定管:依次在1mL石英比色皿加入100μL上清液、800μL预热的试剂二和100μL试剂三,迅速混匀后于265nm比色,记录10s和130s的吸光值A3和A4,△A测定管=A4-A3。
注意:标准管只需测定一次。
计算公式:
(1). 按蛋白浓度计算
DHA(nmol/mg prot) =[C标准液×△A测定管÷△A标准管×V标准]÷(Cpr×V样)
=100×△A测定管÷△A标准管÷Cpr
(2). 按样本质量计算
DHA(nmol/g鲜重) =[C标准液×△A测定管÷△A标准管×V标准]÷(W×V样÷V样总)
=100×△A测定管÷△A标准管÷W
(3). 按细胞数量计算
DHA(nmol/104 cell) =[C标准液×△A测定管÷△A标准管×V标准]÷(W×V样÷V样总)
=100×△A测定管÷△A标准管÷细胞数量
(4)按液体体积计算
DHA(nmol/mL) =[C标准液×△A测定管÷△A标准管×V标准]÷V样
=100×△A测定管÷△A标准管
C标准液:100μmol/L;V标准:加入反应体系中标准液体积,0.1mL;V样总:上清液总体积,1.0 mL=0.001 L;V样:加入反应体系中上清液体积,0.1mL;W:样品质量,g。
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文献和实验更为丰富。 不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法,都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。 维生素 C 在金属铜和抗坏血酸氧化酶存在下极易氧化,因此,在用铜制品做食品时,维生素 C 易丢失。此外在碱性溶液中,维生素 C 也易被破坏,而在酸性溶液中比较稳定。利用它具有的还原性质可测定其含量。还原型抗坏血酸能被染料 2 , 6- 二氯酚靛酚氧化为脱氢型,该染料在碱性溶液中呈蓝色,在酸性溶液中呈红色,被还原后变为无色
学和临床方面的重要意义,故对食物和生物材料中维生素含量的测定是十分必须的。抗坏血酸的定量测定方法很多,有2,6-二氯酚靛酚(简称DCIP)滴定法、碘滴定法、2,4-二硝基苯肼法、Folin试剂比色法、紫外吸收法等。其中广泛采用的是DCIP滴定法,它具有简便、快速、比较准确等优点,适用于许多不同类型样品的分析。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量,易受其他还原物质的干扰。如果样品中含有色素类物质,将给滴定终点的观察造成困难。 在酸性环境中,抗坏血酸(还原型)能将染料
一、实验目的 了解和掌握荧光分光光度计的使用方法 二、实验原理 测Vc 的实验原理:抗坏血酸在氧化剂存在下,被氧化成脱氢抗坏血酸,氧化型的抗坏血酸与邻苯二胺作用生成荧光化合物(脱氢抗坏血酸对-氮杂萘),此荧光化合物的激发波长是350nm,荧光波长在430nm,其荧光强度与抗坏血酸含量成正比,样品的荧光强度与抗坏血酸标准样品荧光强度相比较,即可计算出样品中抗坏血酸的含量。 测VB2的实验原理 :维生素B 2 (核黄素)在468nm紫外光激发下产生
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