
原核蛋白表达-原核(E. coli)表达系统
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- 目前应用最广泛,也是最经济实惠的蛋白表达系统
- 南京市江北新区浦乌北路11号
- 2025年07月11日
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- 文献和实验
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- 提供商:
德泰生物
- 服务名称:
单抗SingleB®快速发现
原核(E. coli)表达系统
大肠杆菌蛋白表达系统是目前应用最广泛,也是最经济实惠的蛋白表达系统。E.coli遗传背景清楚、表达系统完善、操作方便、增殖快、成本低、表达量高、稳定性好,适用于多种属蛋白的表达,尤其对小分子蛋白的生产具有极大的优势,但原核表达易形成不可溶的包涵体。德泰生物拥有超十年的蛋白表达经验,丰富的包涵体复性经验,可提供从密码子优化到重组蛋白表达纯化的一站式服务。
服务优势
| 经验丰富 原核表达蛋白3000+ |
高成功率 成功率>95% |
自主研发 上清表达优化 |
一站式服务 从密码子优化到 |
服务内容
| 序列分析&密码子优化 1天 客户提供目的蛋白序列,德泰对稀有密码子、密码子偏好性等因素进行分析优化 |
基因合成&载体构建 1周 对合成的基因进行测序验证,克隆至德泰专有的高效表达载体中 |
表达小试&可溶性分析 1周 选择不同菌株进行多种表达条件优化,提高蛋白可溶性表达 |
放大表达&纯化 1-2周 选择合适的纯化方法,结合先进的AKTA纯化设备来纯化蛋白 |
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文献和实验最近2个月都在做原核表达,刚开始什么都不会,连SDS-PAGE都跑成模糊的一片,其中的辛酸只有自己知道,现在实验慢慢上正轨了,自己也积累了一些经验。很怀恋之前探索的那段时光,现在把我做蛋白表达的过程和一些问题写出来,希望能够帮助开始做蛋白表达的人少走一些弯路。 1、表达载体的构建构建表达载体是比较简单的,不过也是需要对你的蛋白还有所用的载体有一个详细的认识,对于比较大的蛋白最好选用能够助溶的标签,但是也不是固定的,比如我的蛋白有65-70KD,我也用的也是HIS,上清也是有少量表达。最关键
由NEB在中国投资的纽英伦生物技术(北京)有限公司正式成立,据说这是为了表彰一位中国科学家的杰出贡献而首次在美国本土以外设立分厂.顺应国内市场的要求,NEB中国专门为国内市场提供特别小包装――常规小包装的一半(反正他家小包装的量也超大的),这样单个成本就便宜多啦. NEB出品的原核表达有两类融合表达系统,pMAL™是久经考验的可溶性表达系统,以麦芽糖结合蛋白为融合表达框架的蛋白融合表达纯化系统,另一个就是刚发布时震动整个原核表达界的IMPACT(Intein Mediated
好的质粒交给细菌后,有些事情是我们不能控制的,未知的。尝试其他的表达系统未尝不是一种办法。不过原核不能表达,转去做真核,也不保险,这时候试试体外表达,会更省事,因为没有细胞生长的限制,更容易得到结果,可能只是花费高些,产量低些。能做出结果是第一需要时,这些就不能计较太多。随后将介绍几个体外表达系统,欢迎留意。 如果你成功表达出来了,首先要恭喜你,之后你仍然可能遇到各种各样的问题。这个很正常,科研的道路是曲折的嘛。 Q1:蛋白表达出来了,但是跑SDS-PAGE时大小不符
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