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特殊染色
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湘元生物
病理组织切片染色技术作为病理实验室基本方法之一,具有较高的使用价值,也是目前临床外科病理最基本、最常见的形态学检验技术。组织切片染色就是利用染料在组织切片上给予不同颜色,使其与组织或者细胞内的某种成分发生作用,经过透明后通过光谱吸收和折射,使其各种微细结构能显现不同颜色,这样在显微镜下就可显示出组织细胞的各种成分。最常见的组织染色是HE染色,另外湘元生物还可开展其他特殊染色项目,如masson染色、PAS染色、AB-PAS染色、EVG染色、VG染色、维多利亚蓝染色、番红-固绿染色、甲苯胺蓝染色、油红O染色、阿利新蓝染色、碱性磷酸酶染色、瑞氏姬姆萨染色、普鲁士蓝染色、TTC染色及髓鞘染色等。
1、切片
2、染色
3、白光拍照
4、结果分析
番红固绿染色原理
番红固绿染色原理是一种组织学染色方法,常用于对组织切片中胶原纤维和肌纤维进行染色。该方法的原理是:组织切片首先经过甲醛等固定剂固定,然后使用番红染色,番红可染色蛋白质和胶原纤维,使它们变为粉红色。接下来再用酸性绿染色剂染色,酸性绿主要染色肌肉纤维,使它们呈绿色。经过两种染色后,胶原纤维和肌肉纤维就可以清晰地区分出来,呈现出不同的颜色,使组织结构更加明显。
番红固绿染色实验步骤
1、脱蜡
1) 70 ℃烤片30 min;
2) 二甲苯(I)中脱蜡10 min;
3) 二甲苯(II)中脱蜡10 min;
4) 100%乙醇(I)中5 min洗去二甲苯;
5) 100%乙醇(II)中5 min洗去二甲苯;
2、水化
1) 95%乙醇中水化5 min;
2) 85%乙醇中水化5 min;
3) 75%乙醇中水化5 min;
4) 蒸馏水中水化待用;
3、染色
1) 番红染色1-2 h;
2) 流水稍洗;
3) 固绿染色1min 左右;
4、脱水
1) 无水乙醇脱水5 min;
2) 无水乙醇脱水5 min;
5、透明
1) 二甲苯(I)透明5 min;
2) 二甲苯(II)再次透明5 min;
6、封片
在石蜡切片的中央滴加一滴中性树胶,盖上盖玻片封固。显微镜下观察拍照。
尼氏染色实验操作步骤:
1、新鲜组织固定于10%中性formalin溶液48h后,常规脱水包埋;
2、切片厚6-8μm,常规脱蜡至水;
3、蒸馏水冲洗;
4、切片入Toluidine blue Stain,将染色缸置于恒温箱50-60°C侵染25-50min;
5、蒸馏水稍冲洗;
6、入70%乙醇冲洗;
7、95%乙醇迅速分化。提醒:分化不易控制,如果分化失败,可重复步骤4;
8、无水乙醇迅速脱水;
9、二甲苯透明,中性树胶封固;
10、显微镜下观察、拍照。
PAS染色实验操作步骤:
1、组织石蜡包埋切片后脱蜡至水,蒸馏水洗2min(提醒:细胞爬片4%多巨甲醛固定后水洗);
2、滴加过典酸溶液,氧化5min;
3、蒸馏水洗10min;
4、滴加Schiff试剂,侵染10-20min;
5、倾去Schiff 试剂,流水冲洗10min;
6、滴加苏木素染色液,染核1-2min;
7、流水冲洗5min;
8、酸性乙醇分化液分化;
9、Scott反蓝水洗3min;
10、常规透明、封片。
服务流程:
关于我们-湘元生物
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