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英文名称 Poly-Lysines
简称 PLL-FITC,FITC-PLL
分子量 8000现货,其他根据要求定制
存储条件 -20°避光干燥
保存时间 一年
魅罗科技MeloOEG不仅生产开发各种荧光标记的赖氨酸聚合物,比如FITC,CY,RB等。同时提供多聚赖氨酸基团改性,多聚赖氨酸交联聚乙二醇共聚物Poly(L-lysine)/PLL,嵌段共聚物PEG带各种的活性基团MAL /OH /COOH/NH2/N3等;多聚赖氨酸和PLGA聚乳酸-羟基乙酸/PCL聚己内酯/PLA聚乳酸等形成嵌段共聚物可以用来做纳米粒子。
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文献和实验当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体,也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
(一) 原理 目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗 达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε 氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧光灯源紫外线或兰紫光 激发下产生黄绿色荧光,通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定 性、定位或定量
浓度为20mg/ml,缓冲液容量为总量的1/10,混匀,将三角烧瓶置冰槽中,电磁搅拌速度适当,即以不起泡沫为宜搅拌5—10min; 2. 荧光素的准备。根据欲标记的蛋白质总量,按每毫克蛋白加0.01mg荧光素的比例,用分析天平准确称取所需的异硫氰酸荧光素粉末; 3. 结合(或称标记)。将称取的荧光色素缓慢加入到球蛋白溶液中,并不停地搅拌,避免将荧光素粘于三角烧瓶壁或搅拌玻璃棒上,在大约5—10min内加完。然后继续搅拌12—18h。因荧光素与球蛋白结合期间要求必须
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