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超氧化物歧化酶活性检测试剂盒
110T/50S
Superoxide Dismutase (SOD) Activity Assay Kit
6个月
北京盒子生工
2-8℃
【Boxbio】超氧化物歧化酶检测试剂盒
超氧化物歧化酶(SOD)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,作为重要的氧自由基清除剂,能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成H₂O₂和O₂。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H₂O₂主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。
黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统能够产生超氧阴离子(O₂⁻),O₂⁻可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜,产物在560 nm处具有特征吸收峰;SOD可清除O₂⁻,从而抑制了甲臜的形成,反应液颜色越深,表明SOD活性愈低,反之活性越高,通过吸光值的变化即可表征SOD的活性。
测定过程中所需要的仪器和试剂:可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。
粗酶液的制备(可根据预实验结果适当调整样本量及比例)
①细菌或细胞:离心收集细菌或细胞至离心管内,按照细菌或细胞数量(10⁴个):提取液体积(mL)为(500-1000):1的比例(建议500万个细菌或细胞加入1 mL提取液)处理样品,冰浴超声破碎(功率20%或200 W,超声3 s,间隔10 s,重复30次),4℃ 8000 g离心10 min,取上清置于冰上待测。
②组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:(5-10)的比例(建议称取约0.1 g组织,加入1 mL提取液)处理样品,冰浴匀浆,4℃ 8000 g离心10 min,取上清置于冰上待测。
③血清(浆)、培养液等液体样本:直接检测或使用提取液适当稀释后检测。
注意事项
①抑制百分率应在30-70%范围内,越靠近50%越准确;若抑制百分率小于30%或大于70%,则需要调整样本量后重新测定:若抑制百分率偏高,则需适当稀释样品;若抑制百分率偏低,则需适当增加样本量后再进行测定,计算时相应调整;
②待测样本和试剂二使用时在冰上放置;
③样本较多时可按表格中试剂用量配置工作液(包含试剂一、二、三),试剂五必须最后加入;
④为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
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