金牌基质胶 低生长因子 无酚红

产品：ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子，10 mL瓶
产品目录号：082703
背景： 在体内，基底膜是以细胞为基础的薄层细胞外基质。ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子是一种可溶性的基底膜制剂，这种基质是通过基因编辑技术将多种表达胶原蛋白的基因序列插入到经永生化处理的小鼠子宫肌瘤细胞系中，并在实体肿瘤中抽提出来的。它的主要成分是层粘连蛋白，接着是胶原蛋白Ⅳ、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋白1,2。ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子也含有转化生长因子 β、表皮生长因子、类胰岛素生长因子、成纤维细胞生长因子、组织纤溶酶原激活物3,4 和 在 肿 瘤 中 自 然 出 现 的 其他 生 长 因 子 。 ABW®Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子对正常和变换的锚着依赖性上皮样细胞和其他细胞类型的附着和分化是有效的。这些细胞类型包括神经元5,6、肝细胞7、支持细胞8,9、小鸡晶状体上皮细胞10 和血管内皮细胞11。在成年大鼠肝细胞12,13、血管内皮细胞 14 以及小鼠15-18 和人19,20 乳腺上皮细胞的三维细胞培养中ABW®Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子会影响基因的表达。这是几种类型肿瘤细胞侵袭的基础21,22，支持体内末梢神经再生23-25，并提供体外26,27 和体内25,28-30 血管再生研究的必需底物。ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子也支持在免疫抑制小鼠中人类肿瘤的增殖31-33。ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子能用于未分类乳腺细胞的移植34， 以及分类的上皮细胞亚群嵌入ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子35,36。这一基质也被用作为癌症干细胞模型并被证明在体内能增强肿瘤生长速率37。

来源： 经基因编辑的小鼠子宫肌瘤细胞
制剂： 达尔伯克改良伊格尔培养基和 50 µg/mL 庆大霉素。ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子适合所有的培养基。
储存： 储存在-20℃ 时是稳定的。通过分装并一次性使用分装物来最小化产品的冻融。在-20℃ 冰箱中储存分装物直到准备使用。请不要储存在无霜冰箱中。请保持产品的冻结。
有效日期： ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子的有效日期是批次特异的，您可以在产品的分析证明书中找到，在-20℃ 条件下能储存24个月以上。
警告： 因为ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子在10℃ 以上会开始凝胶化，所以极其重要的是ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子和所有的进入与ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子接触的培养皿或培养基都 应 该 预 冷 。 在 实 验 的 全 部 过 程 中请 保 持 ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子处 于冰上。

 重构和使用： 在ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子小瓶冻融的过程中可能会发生颜色的变化，由于二氧化碳和碳酸氢盐缓冲液以及酚红的作用，颜色会从淡黄色变化到深红色。颜色的变化是正常的，不会影响产品的功效，颜色将会在5%CO2 平衡下消失。请将小瓶淹没在冰中并放置在 4℃ 冰箱里过夜解冻 ABW® Matrigel® 基质。一旦ABW®
Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子被解冻，请涡旋小瓶以确保材料的均匀分散。请将ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子全程保持在冰上。请使用无菌技术处理。请将解冻的ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子放置在无菌的区域，在小瓶的顶部喷洒70% 的乙醇并风干。
使用预冷的移液管轻柔的吸取ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子以确保其均匀性。将ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子分装到离心管中，每当ABW®
Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子堵塞吸头和/或移液管测量不精确时请更换吸头。如果将材料放置在 4℃ 的冰上 24-48 个小时，凝胶化的ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子可能会被重新水化。
ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子可以被用来作薄层凝胶(0.5 mm)，细胞可以接种在其顶部。当作为 1 mm 凝胶层使用时，细胞也可以在ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子的内部培养。大量的稀释将会导致 1 个薄的、非凝胶化的蛋白层。这对于细胞附着是有用的，但是在分化研究中可能不起作用。

使用方法：
包被涂层方法：
ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子可以以几种方式使用。薄层凝胶法适用于在凝胶顶部接种细胞，厚层凝胶法允许您在三维基质内培养细胞，薄层包被法(不凝胶化)给您提供了复杂的蛋白质层，您可以在其上培养细胞。您的选择基于您想要实现的最终结果，无论是细胞生长、附着还是分化。

注意：在www.abwbio.com网页上发布了具体的应用程序*。ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子产品的蛋白质浓度是批次特异的并提供在分析证明书上。通过计算需要的特定蛋白浓度(mg/mL)获得了稀释ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子产品的一致结果。为了维持凝胶化的一致性，我们推荐不要将ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子稀释到少于 3 mg/mL。请使用冰冷的无血清培养基来稀释ABW®Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子。通过在冰上移液管上下吸液或涡旋小瓶来混合。

细胞复苏：
使用细胞复苏溶液在冰上 7 小时内解聚ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子能够实现将生长在ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子上的细胞最有效地复苏，或者使用中性蛋白酶，考虑到连续培养，中性蛋白酶作为一种金属酶可以分散细胞。
注意事项：
因为ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子在 10℃ 以上会开始凝胶化，所以极其重要的是ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子和所有的进入与ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子接触的培养皿或培养基都应该预冷。产品需要放置于冰上，并在 2℃-6℃的冰箱中或者冷室中过夜融化，蛋白浓度高时可能需要更多时间。操作ABW Matrigel matrix时，我们建议使用预冷的移液管、吸头和管子。在实验的全部过程中请保持ABW® Matrigengel 无酚红基底膜基质低生长因子处于冰上。