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文献和实验This protocol is essentially as described by Murray (1991), Cell Cycle Extracts. In Methods in Cell Biology, B.K. Kay and B. Peng, eds
在开展组织培养技术的初期,为了使所培养的组织能够增殖,认为有必要向培养基中添加胚的生理盐水提取物(胚压榨汁, embryo juice)。对胚提取物的有效成分虽曾进行过许多分离和测定,但并未成功。目前,由于对组织培养基已经有了改良,所以不添加这种成分较为复杂的胚提取物,也能使培养的组织得到充分的增殖,所以现在胚提取物已经很少使用了。
提提取物之前一天注射绒促酶,用0.65%生理盐水配制,每管以500ul溶解。14:00进行第一针注射,100ul/只。放在暗室静置6h。20:00注射第二针,450ul/只,将蛤蟆放入0.65%盐水中,暗室,静置12h(不超过)。第二天收卵。 1. 冷却离心机至16 o C 2. 配工作液(MMR、XB、XEB2),准备玻璃容器,用蒸馏水冲洗 3. 收卵在玻璃容器中(烧杯、或者锥形瓶),将水去除。卵不可以暴露在空气中
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