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Nuclei Extraction Buffer
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德国美天旎生物技术有限公司
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2−8°C
细胞核提取缓冲液用于温和、快速、有效地从新鲜和冰冻组织中生成单细胞核悬液。与gentleMACS组织解离器、制冷模块和C管配套使用，可实现标准化、高得率地生成高质量的细胞核悬液，且操作便捷，无需预冷试剂耗材。
细胞核提取缓冲液可从广泛的组织类型中制备单核悬浮液，包括脑、肝脏、心脏、胰腺和肾脏，以及人和小鼠的实体肿瘤。这一方案适用于从瞬间冷冻组织中提取细胞核，也适用于OCT包埋组织和新鲜组织。与gentleMACS 组织解离器和C管一起使用，可在4°C下、7分钟内提取细胞核，且可以并行处理多达8个样本。
提取的细胞核可以进一步使用细胞核分选磁珠富集纯化有，并适用于多种应用，包括单细胞核基因表达分析和单细胞ATAC-seq。
小鼠脑和肿瘤制备的单细胞核悬液 
从瞬间冷冻的小鼠组织和OCT包埋的人肿瘤制备的单细胞核悬液 
用细胞核提取缓冲液提取的细胞核保持RNA完好 
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文献和实验- Hinte et al (2024) Adipose tissue retains an epigenetic memory of obesity after weight loss. Nature 636(8042):457-465. doi: 10.1038/s41586-024-08165-7
- Schartz et al (2024) C5aR1 antagonism suppresses inflammatory glial responses and alters cellular signaling in an Alzheimer’s disease mouse model. Nat Commun 15(1):7028. doi: 10.1038/s41467-024-51163-6
- Hanlon et al (2024) In vivo selection in non-human primates identifies AAV capsids for on-target CSF delivery to spinal cord. Mol Ther 32(8):2584-2603. doi: 10.1016/j.ymthe.2024.05.040
- Bormann et al (2024) Single-nucleus RNA sequencing reveals glial cell type-specific responses to ischemic stroke in male rodents. Nat Commun 15(1):6232. doi: 10.1038/s41467-024-50465-z
- Lim et al (2024) ASS1 metabolically contributes to the nuclear and cytosolic p53-mediated DNA damage response. Nat Metab 6(7):1294-1309. doi: 10.1038/s42255-024-01060-5
- Ocañas et al (2023) Microglial senescence contributes to female-biased neuroinflammation in the aging mouse hippocampus: implications for Alzheimer’s disease. J Neuroinflammation 20(1):188. doi: 10.1186/s12974-023-02870-2
- Pollock et al (2024) bioRxiv doi: 10.1101/2024.10.11.617923
操作演示
质组分，最后得到一系列的亚蛋白质组 [8] 。首先得到漂洗组分包含核膜和残留细胞骨架的蛋白质。随后得到的镏分可溶解在含有 EDTA 的低离子强度缓冲液中，此溶液被称为 S2 , 从这里我们得到溶解性最好的核蛋白质，即核糖核蛋白。第三步，在用糖核酸酶反应后，我们会提取到染色质蛋白质。最后的两份馏分中含有细胞核基质蛋白质，先溶解在高盐缓冲液中，然后得到不溶的沉淀。这些不溶性沉淀和含有 RNA 的微丝网有关系 [ 10] 。 在提取一系列的蛋白质之后，每份馏分都在适合的缓冲液里溶解，以便于单向电泳或双向
HeLa Cell Nuclei Preparation (John Garland) Prepare nuclear extract from HeLa cell ・ Extract Preparation (Brent Graveley) Preparation of nuclear extract and cytoplasmic extract ・ Pol
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