
碎片去除溶液
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大量
- 英文名:
Debris Removal Solution
- 供应商:
德国美天旎生物技术有限公司
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2−8°C
碎片去除溶液是一款即用型密度梯度试剂。用于在各种类型的组织解离后,快速有效地去除细胞悬液中的细胞碎片,同时可在离心过程中应用全加速和全制动。
组织解离后的细胞悬液常常含有细胞碎片,会影响下游应用。碎片去除溶液能够在组织解离后快速且有效地去除细胞碎片,实现高质量的下游应用,包括细胞分选、流式分析和细胞培养等。已经经过从分离的大鼠和小鼠心脏组织以及人和小鼠肿瘤组织中去除细胞碎片的验证测试。
成年大鼠心脏解离后的细胞悬液
细胞悬液经过碎片去除质量优化
碎片去除操作概览(步骤6-13)
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文献和实验- Wang et al (2024) ACSL4 and polyunsaturated lipids support metastatic extravasation and colonization. Cell Epub. doi: 10.1016/j.cell.2024.10.047
- Xu et al (2024) IRE1α silences dsRNA to prevent taxane-induced pyroptosis in triple-negative breast cancer. Cell Epub. doi: 10.1016/j.cell.2024.09.032
- Ollivier et al (2024) Crym-positive striatal astrocytes gate perseverative behaviour. Nature 627(8003):358-366. doi: 10.1038/s41586-024-07138-0
- Gulen et al (2023) cGAS–STING drives ageing-related inflammation and neurodegeneration. Nature 620(7973):374-380. doi: 10.1038/s41586-023-06373-1
- Huang-Hobbs et al (2023) Remote neuronal activity drives glioma progression via Sema4f. Nature 619(7971):844-850. doi: 10.1038/s41586-023-06267-2
,10 min 收集细胞,然后换为新的不含外泌体的培养基或者无血清替代培养基继续培养 24-48 小时,根据细胞的生长速度确定收取上清时间; 3)收集细胞上清,300 g,4°C,离心 10 min,小心收集上清,注意避免吸入细胞或者细胞碎片; 4)3000 g,4°C,再次离心 15 min,确保将细胞或者细胞碎片去除干净; 5)取上清,注意避免吸入细胞或者细胞碎片,合并相同的细胞培养液上清样品,装入无菌容器,可在 4°C 短期保存(1-2 天),长期保存可冻存于-80°C。建议细胞上清分离后尽快
性选择不同强度的解离方式。 (1)根据肿瘤组织的坚硬度和目的细胞不同,可以选择合适的解离方案。 (2)剔除坏死/出血区域(剪刀精细修剪),保留活性肿瘤组织。 (3)由于肿瘤组织比较坚硬,会产生较多碎片和死细胞,影响下游实验可以通过Ficoll或者去死或碎片去除试剂盒(Debris Removal Solution,130-109-398)优化肿瘤样本。 6. 如何得到肝实质细胞? 小鼠和大鼠的肝脏组织包含实质细胞和非实质细胞(Kupffer细胞、肝星状细胞、肝窦内皮细胞、胆管上皮细胞、免疫
基中的营养物质(包括外泌体)全部消耗掉的,这时的上清液中的外泌体含量大幅度下降。 接着,从细胞上清液的预处理下手。拿到细胞上清液收集后该如何处理呢?这是一个常见问题。我们先要弄清楚细胞上清液中会有什么物质?除了我们感兴趣的外泌体外,还有少量细胞、细胞碎片、游离蛋白、脂类等。我们首要做的就是通过差速离心尽可能的去除一些杂质物,先用 800 ~ 1000g 左右的离心力 10 分钟有效去除细胞残留,取上清后,再 8000 ~ 10000g 离心 10 分钟有效去除细胞碎片







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