- ￥2000 - 5000
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM0301531
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
/
- 库存：
10~100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
25T/50T
| 规格： | 25T | 产品价格： | ￥2000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50T | 产品价格： | ￥5000.0 |
温州科淼生物科技有限公司(Whenzhou KeMiao Biological Technology Co.,Ltd)是一家专业从事“产品研发生产，市场销售，技术服务”为一体的高科技生物技术公司，致力于为科研实验服务，主要产品为试剂盒、抗体、蛋白、相关溶液等其他相关试剂。
PCR技术定义
聚合酶链反应技术（Polymerase chain raction ,PCR）是一种在体外扩增特定DNA片段的方法，具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点，可用很短时间使目的基因或某一片段扩增十万乃至几百万倍。
检测原理
PCR（Polymerase chain raction ），又称聚合酶链反应技术，是一种类似于DNA的 天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引 物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合 物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。
试剂盒组成
| 名称 | 50T配置 | 保存 |
|---|---|---|
| 2×Probe qPCR MagicMix | 500μL | -20℃ |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL | -20℃ |
| 探针法 qPCR 引物-探针混合液 | 150μL | -20℃ |
| qPCR 阳性 对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL | -20℃ |
| 说明书 | 50μL | / |
试验所需自备物品
样品DNA或RNA
操作步骤
1.稀释阳性对照制备标准曲线样品
2.制备样品DNA或RNA(可以用自选方法纯化样品的DNA或RNA，也可以咨询客服推荐)
3按照说明书制备Probe qPCR反应。
PCR程序（三步法）
第一步：94℃变性30s；
第二步（循环30-35次）：94℃变性30s，55-60℃退火30s，72℃延伸24s（时间按照合成速度和长度来计算）；
第三步：72℃终止延伸5-10min。
PCR试剂盒特点
1.操作简单，即开即用，用户只需提供样品模板；
2.专一性好，特异性强；
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品；
4.一管式闭管操作，降低了交叉污染；
备注：1.本公司提供各类指标的PRC试剂盒，包括染料法和探针法，另提供相关试剂。
2.需详细说明书请联系客服。
联系方式如下：
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联系电话：13997448220(同微信) QQ：1750215841
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文献和实验如果您的样本是组织，取样的过程非常重要。组织内部是有内源性 RNase 存在的，组织离体后内源性 RNase 则开始发挥作用，RNA 产生降解。所以离体的组织必须立马放在液氮中速冻，之后转移至 -80℃ 长期保存，且避免反复冻融。研磨组织的过程中需要保证在液氮环境中研磨。RNA 提取的过程中，保证样本的上样量不超过提取试剂盒说明书中规定的最大上样量，上样量过多，同样会造成 RNA 降解。 ②如果您的样本是细胞，则样本搜集过程要简单的多了，只要保证细胞状态良好（细胞状态差也容易造成提取的 RNA 降解
标记（生物素、荧光、地高辛和Eu3+等）、引入与蛋白质结合的DNA序列、引入突变位点、插入与缺失突变序列和引入启动子序列等。 2 特定PCR的引物设计 在尽量遵循引物设计基本原则的同时，根据不同的实验目的，需要注意一些相应的事项，总结如下： 01 荧光定量PCR 荧光定量PCR有染料法和探针法两种。染料法只需要设计引物，而探针法除设计引物之外还得设计一条探针。 引物设计要尽量满足以下要求： 确保模板是cDNA
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