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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
BisBenzlimide Hoechst 33258
- CAS号:
23491-45-4
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
−20°C
- 规格:
25mg
英文别名:33258hoechs
英文名:BisBenzlimide Hoechst 33258
储存条件:−20°C
CAS:23491-45-4
级别:Reagent Grade
分子式:C25H24N6O · 3HCl
分子量:533.88
纯度:≥98% (HPLC)
物理性质:H2O: soluble10 mg/mL , water and ethanol: soluble10 mg/mL ,phosphate buffer: precipitates
产品用途:Hoechst 33258的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;Hoechst 33258和双链DNA结合后,最大激发波长为352nm,最大发射波长为461nm。细胞遗传学研究的常用试剂,荧光染色细胞的DNA ,插入DNA的A-T区,具有低的细胞毒性,形成膜渗透性荧光DNA链
使用说明:
1. 对于固定的细胞或组织:
a. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或培养的组织:
a. 加入适当量Hoechst 33258染色液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液,用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。细胞发生凋亡时,在荧光显微镜下观察会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验Hoechst 33258 10 mg/ml (分子探针 H3569) ●10XTNE储存缓冲液 ●0.45μm的过滤水 3. 考虑因素 3.1 DNA样品中的AT含量会影响到Hoechst 33258-DNA荧光,因此,检测样品时设一对照是非常重要的,小牛胸腺DNA由于是双链、高度聚合并含有大约58%的AT(42% GC)而经常被用作动植物DNA的对照。对于细菌DNA
Hoechst 33258染色1.原理 Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌人性荧光染料。它们在活细胞中 DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中 摄取该染料。从而使细胞核着色。故又把此类染料称为DNA探针。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechsr-DNA的激发和发射波长分别550nm和460nm。在荧光显微镜紫外光激发时,Hoechst-DNA发出亮
颗粒位于细胞表面和细胞之间。 ②荧光染色法:荧光染色用能与DNA特异性结合的荧光染料Hoechst 33258,可使支原体内含有的DNA着色,染色后用荧光显微镜观察。具体方法如下:首先将细胞接种盖玻片上,在细胞未长满前取出玻片,用不合酚红的Hanks液漂洗一下,用l: 3醋酸甲酵固定10Min,然后用生理盐水漂洗。置于用生理盐水配浓度为50pg/ml的Hoechst 33258中染色10min。染色后用蒸溜水洗1—2min。向细胞面滴加pH5.5磷酸缓冲液数滴,然后置荧光显微镜下观察。镜下支原
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