- ￥228
- 博尔森/BIOESN
- BES21646KB
- 中国
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
10×Western Hybridize Premixed Powder
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
RT
- 规格：
1 L/Pouch
10×Western 转膜缓冲液(干粉)
Western 转膜缓冲液预混干粉，精选优质原料，经过特殊加工处理，呈白色粉末状，溶解性好，使用起来方便快捷。可迅速配制成含 Tris， Glycine，SDS 的溶液。
使用说明：
1．每袋粉剂可配制成1000 ml 的10×的 Western 转膜缓冲液。
2．配制时用去离子水或双蒸水作为溶剂。同时备有无水甲醇。
3．将包装袋中的粉剂全部溶于600 ml 的去离子水或者蒸馏水中，并定容至800 ml，
4．使用前再加入200ml 甲醇混匀。
注意事项：
1．配制溶液前确保所需器材洁净。
2．拆包装时，避免袋中粉末撒出；袋内残留少许干粉，略有结块不影响实验效果。
3．操作中请穿戴实验服和一次性手套，废弃包装袋及用品请弃于专用的垃圾袋内。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验转印夹，注意 PVDF 膜与胶，PVDF 膜与滤纸，滤纸与胶之间不可有气泡。 2） 转印槽加满转膜缓冲液，插入电转印夹，将转印槽放入冰水中，确保 PVDF 膜靠近正极，带负电的氨基酸和蛋白质向正极迁移。 3） 转膜选择恒流，每个转印槽建议电流为 150-300 mA，时间依据目的蛋白条带分子量大小做适当调整。 4） 转膜结束后，将 PVDF 膜置于丽春红染色液中，室温 5-10 分钟即可见红色条带，用洗涤缓冲液洗数次可洗掉红色条带进行后续实验 。 封闭 1） 漂洗印迹膜：使用洗涤缓冲液室温适当漂洗
1、试剂耗材的准备：（1）转膜缓冲液（48 mM Tris-HCl，39 mM 甘氨酸，0.037% SDS，20%甲醇）：（2）10 × 丽春红染液：（3）TBS 缓冲液：（4）TBST 缓冲液（含20%Tween20 的TBS 缓冲液）：（5）封闭液（含5%脱脂奶粉的TBST 缓冲液）：（6）一抗、二抗及抗体稀释液：参照说明书，以封闭液或TBST 进行稀释。（7）底物显色液ECL，4℃ 避光保存，现用现配。（8）显影液和定影液用水稀释10 - 20 倍于铝盒中，可多次使用。室温避光存放
培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌
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