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- 2025年08月15日
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优利科（上海）生命科学有限公司
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产品名称：96孔板经典法质粒DNAout
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核酸概述：
一、核酸的分类
生物的核酸包括脱氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA两大类；细胞中的RNA包括mRNA、tRNA、rRNA三大类。
二、生物的遗传物质
1.某些病毒以RNA为遗传物质。这些病毒又叫做RNA病毒，所含核酸也只有RNA。如HIV、H1N1、SARS、烟草花叶病毒等。
2.还有某些病毒以DNA为遗传物质，这些病毒又叫做DNA病毒，所含核酸也只有DNA。如T2噬菌体等。
3.以细胞为结构和功能基本单位的生物，细胞中同时含有DNA和RNA。
包括所有的原核生物、真核生物。这些生物都以DNA为遗传物质，而不以RNA为遗传物质。
三、核酸的分布
1.RNA病毒的RNA由核衣壳包裹，不与组蛋白结合成染色体。
2.原核细胞的RNA分布在细胞质基质、核糖体中，不与组蛋白结合成染色体。
3.真核细胞的RNA分布在细胞核、细胞质基质、线粒体、叶绿体、核糖体中，不与组蛋白结合成染色体。
4.DNA病毒的DNA由核衣壳包裹，不与组蛋白结合成染色体。
5.原核细胞的DNA分布在拟核、质粒中，不与组蛋白结合成染色体。
6.真核细胞的DNA主要分布在细胞核中，与组蛋白结合成染色体。
7.真核细胞的线粒体、叶绿体两种细胞器也具有自己的DNA和RNA。但都不与组蛋白结合成染色体。
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文献和实验基因。实验报告基因用于测试实验条件下基因的表达，而对照报告基因作为内对照，以使实验报告基因测试的结果归一化。作归一化可消除实验过程中减弱实验准确度的变化，如培养细胞的数量、细胞转染 及裂解的效率等。在研究转录调控启动子活性中，具体实验步骤如下。 1. 质粒转染细胞 1) 细胞 铺板：将细胞按70%的汇合度接种到96孔板。 2) 转染：16h后转染萤光素酶报告基因 质粒和RNA，每个样品设置6个复孔 a) 配制DNA和转染试剂 : 96孔板转染质粒时
【原创】基因组编辑三大工具ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9筛选基因敲除细胞系阳性克隆Protocol
这些方面的进展。关于这些技术的具体原理和操作细节，请查看我之前的帖子附件详细介绍。不清楚的请联系我咨询。此贴主要谈一谈在用这些技术进行癌细胞株阳性细胞克隆筛选的过程中，如何进行阳性克隆筛选，为初次接触这些新技术的研究者提供一些参考意见。一般CRISPER-Cas9质粒转染后，采用有限稀释法接种到96孔板中长克隆，待到单个细胞长到几百到1000个细胞左右时，显微镜下仔细观察每一个孔的细胞，若发现非单克隆的细胞需要将其标注出来剔除筛选之外。传两代后，取出单个克隆的一部分细胞提取基因组DNA。分析敲除位点
，能够生长的菌株就是成功转化的。说了这么多，我们怎么得到这么好的质粒呢？下面我想大家介绍一种最经典，也是最灵活的质粒提取步骤和每个步骤的原理。细菌的培养1. 从琼脂 LB 平板上挑取单菌落，接种到液体 LB 培养基中，过夜培养。Tips：菌体里的质粒一般含有抗生素抗性基因，在细菌培养过程中要向培养基中加入相对应的抗生素，以防质粒丢失。细菌的收获，裂解细菌的收获一般通过离心进行，而细菌的裂解有多种方式，包括离子型 / 非离子型去污剂，有机溶剂，或者碱裂解，加热等。选择哪一种方式主要看质粒的大小，大于
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