- ￥228
- 博尔森/BIOESN
- BES21564KB
- 中国
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
10×Tris-EDTA Antigen Retrieval Solution
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
常温
- 规格：
100mL
10×Tris-EDTA抗原修复液（pH9.0）
保存：常温保存，保质期 1 年。
产品内容：
产品说明：
组织在制作过程中，由于化学试剂的作用封闭了抗原，又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲，致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来，为了解决上述的问题，利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。柠檬酸盐、EDTA 或 Tris 等缓冲液在热的条件下可以使被福尔马林屏蔽的抗原重新暴露出来，同时又不会对抗原表位造成破坏，从而提高抗原的检出率，降低背景染色，提高诊断的准确率。
Tris-EDTA 抗原修复液(10×,pH9.0)可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果，亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时，可考虑进行抗原修复。按照每个片子需要 10ml 抗原修复液(1×)计算，100ml 抗原修复液(10×)可以用于 100 个样本的抗原修复。
操作步骤:
(一)石蜡切片
1．脱蜡至水
①二甲苯 3 次，每次 3～5min。
②无水乙醇脱水 2 次，每次 3～5min。
③95%的乙醇，3～5min。
④90%的乙醇，3～5min。
⑤80%的乙醇，3～5min。
⑥70%的乙醇，3～5min。
⑦蒸馏水冲洗 2 次，每次 3～5min。
2．抗原修复
①用去离子水或双蒸水稀释 Tris-EDTA 抗原修复液(10×,pH9.0)至 1×。
②将切片浸泡在 Tris-EDTA 抗原修复液(1×)中，95℃或沸水加热约 10～30min。
③抗原修复液(1×)使用前需预热到 95～100℃。如果使用微波炉加热，避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20～30min 内冷却至室温。
3．免疫染色洗涤液洗涤 1～2 次，每次 3～5min。
4．封闭等后续的免疫染色步骤。
(二)冰冻切片：
1．用去离子水或双蒸水稀释 Tris-EDTA 抗原修复液(10×,pH9.0)至 1×。
2．免疫染色洗涤液洗涤切片 5min。
3．将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95℃或沸水加热约 10～30min。
4．抗原修复液(1×)使用前预热至 95～100℃。如果使用微波炉加热，避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20～30min 内冷却至室温。
5．免疫染色洗涤液洗涤 1～2 次，每次 3～5min。
6．进行封闭等后续的免疫染色步骤。
(三)其它样品：
其它样品参考石蜡切片或冰冻切片进行操作。
自备材料：
系列乙醇
双蒸水或去离子水
加热设备
免疫染色洗涤液
注意事项：
浸泡在抗原修复液(1×)中，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验水质对免疫组化染色结果的影响显著: 在免疫组化染色过程中，实验用水一般用来配制两种试剂: 01 抗原修复液 包括柠檬酸(pH6.0) 、EGTA(pH 9.0) 和EDTA(pH9.0) 等种类，主要用于抗原修复。在免疫组化染色前，必须进行抗原修复，使抗原决定簇充分暴露，以便完全彻底地与抗体结合。未进行抗原修复的抗体即使阳性，其阳性细胞数量及染色强度要明显比进行过抗原修复的少、弱。电导率高的水因杂质存在容易影响溶液pH值，pH值或高或低都会造成抗原修复不佳，抗原决定簇不能完全彻底暴露
使用 3～5 次。 转移缓冲液 1X 电转液： 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 溶解后 4 ℃ 保存，1 次溶液可重复使用 3～5 次。 TBS 缓冲液 加蒸馏水溶解，冰醋酸调 pH 至 7.2，定容至 1000 mL。室温保存。 洗脱液 TBST 溶液 TBS 溶液 1000 mL ，1 mL 吐温 20，混匀后即可使用，最好现用现配。 封闭液（含 5% 脱脂奶粉的 TBST 缓冲液） 溶解后使用，一次性使用。 RIPA（中）裂解液 Tris-base、NaCl、EDTA、SDS
一、SP 法 1）脱蜡、水化；2）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；3）3% H2O2（80% 甲醇）滴加在 TMA 上，室温静置 10 分钟；4）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；5）抗原修复；6）PBS 洗 2～3 次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗 50μl，室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9）4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10）PBS 洗 3 次各 5 分钟；11）滴加 Ⅱ 抗 40～50 μl，室温
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