30% Acr/Bis制胶液(29：1)

30% Acr/Bis制胶液(29：1)

产品内容：

产品说明：

Tricine-SDS-聚凝胶电泳(Tricine-SDS-PAGE)是目前电泳法变性分离多肽的主要方法。此试剂可以制备 20/50 块 0.75 mm× 14 cm×14 cm 胶。

对于大于 5 kDa 的片段，无需制备隔离胶，并且用 AB-3 足以分离。对于小于 5 kDa 的片段，需要制备隔离胶，并且用 AB-6 制备分离胶。

推荐使用 4%浓缩胶，10%隔离胶，16%分离胶作为标准浓度。可以分辨出 1-5 kDa 的片段。

使用方法：

推 荐 在 分 离 多 肽 时 使 用 由 4% 浓 缩 胶 、 10% 隔 离 胶 和 16% 分 离 胶 从 上 到 下 组 成 的 三 层Tricine-SDS-PAGE 胶，下面为配制该胶的流程。

1. 配制 30 mL 16%分离胶和 9 mL 10%隔离胶（足够灌两块 0.75 mm× 14 cm×14 cm 胶）。

A) 标记 2 个 50 mL 的三角瓶，按下表的用量加入各成分：

 

B) 混匀后真空脱气 10-15 分钟。

C) 在分离胶瓶中加入 150 uL 10%的 APS 溶液和 30 uL TEMED 溶液， 轻轻旋转混匀。

D) 灌胶。用一根巴斯德吸管，将分离胶溶液沿着一个隔条的边缘加到玻璃板夹层中，直到溶液的高度距离玻璃上沿还有 5 cm。由于分离胶比重比隔离胶大，故可在其凝固前直接灌隔离胶。

E) 在隔离胶瓶中加入 75 uL 10%的 APS 溶液和 15 uL TEMED 溶液， 轻轻旋转混匀。

F) 灌胶。用巴斯德吸管，将积层胶溶液缓缓地沿着一侧隔条边缘加入到玻璃平板夹层中，直到溶液离玻璃板顶部约 3 cm 高为止。

G) 盖 1cm 高的水饱和的使胶面跟氧气隔绝（氧气会抑制胶的凝固；此处水饱和的可用水代替，但效果会差一些）。

H) 让分离胶和隔离胶在室温聚合 30-45 分钟。

2. 配制 9 mL 4%浓缩胶（足够灌两块 0.75 mm×14 cm×14 cm 胶）。

A) 在一个 50 mL 的三角瓶中，先按下表的用量加入各成分：

 

B) 混匀后真空脱气 10-15 min。

C) 将 75 uL 新鲜配制的 10%的溶液和 15 uL TEMED 溶液加 入到溶液中，轻轻旋转混匀。

D) 灌胶。用巴斯德吸管，将积层胶溶液缓缓地沿着一侧隔条边缘加入到 玻璃平板夹层中，直到夹层中的溶液离玻璃板顶部约 1 cm 高为止。

E) 插入 0.75 mm 厚的塑料梳子，再补加浓缩胶溶液填满梳子间的空隙。 注意避免产生气泡。

F) 让浓缩胶在室温聚合 30-45 分钟。

3. 小心拔出塑料梳子，在上层缓冲槽中加入 1×阴极缓冲液，并用 1×阴极缓冲液冲洗加样孔。

注：10×Tricine-SDS-PAGE 阴极缓冲液用去离子水 1:9 稀释成 1×阴极缓冲液。

4. 在电泳装置的下层缓冲液槽中加入 1×阳极缓冲液。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！