- ￥228
- 博尔森/BIOESN
- BES21491KB
- 中国
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
2×Protein Loading Buffer(Without DTT or β-ME)
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
10mL
2×非还原蛋白上样缓冲液（不含DTT和β-ME）
产品说明：
2×非还原蛋白上样缓冲液 是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，2倍浓缩的蛋白上样缓冲液。产品中含SDS，不含DTT、β-巯基乙醇等还原性试剂。
用于常规的PAGE蛋白样品的上样。
使用方法：
1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解2×非还原蛋白上样缓冲液 。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每5uL蛋白样品加入5uL2×非还原蛋白上样缓冲液的比例，混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液。
3.直接上样到PAGE胶加样孔内即可。
4.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验到 5 ml 的 1X PBS 中。4 °C 缓慢搅拌 2 小时。离心沉淀微球，用 PBS 清洗两次。将微球重悬在 1 倍体积的 PBS 中。（处理后的微球可以在 4 °C 存放 2 周）4. 3X SDS 上样缓冲液：187.5 mM Tris-HCl (pH 6.8 25 °C), 6% w/v SDS, 30% 甘油, 150 mM DTT, 0.03% w/v 溴酚蓝。细胞裂解样品制备1. 吸去培养基。加入含调控因子的新鲜培养基，处理所需的时间。2. 在非变性条件下收集细胞，弃去培养
和靶蛋白 Y 来自细胞裂解液，那么裂解液配方建议选择非变性裂解液，NaCl 浓度＜150 nM，SDS 浓度＜0.2% 洗涤液---去除非特异结合蛋白，顾及互作蛋白间的结合强度优化配方 如果互作蛋白作用较弱，建议选择 PBS 或者 TBS 进行洗涤 通常会加入去垢剂降低背景，比如 0.5-1% NP-40/TritonX-100/CHAPS 如果效果还不佳，还可增加盐离子浓度，比如＜250 nM NaCl，以及加入1-2 nM DTT/β-ME 还可增加洗涤次数，比如 3-5 次 洗脱液---
ul，再加50ul 2×上样缓冲液，煮10min，取20ul上样，就可以了。 7、检测蛋白诱导： 从培养的不同时期各取出1ml，12000g×1min离心。将沉淀重悬于100ul 1×SDS上样缓冲液（50mM Tris-Cl（pH6.8），100mM DTT，2％SDS，0.1％溴酚蓝，10％甘油）中，100℃加热3min，然后12000g×1min离心。上样15ul，6％SDS-PAGE电泳。 《分子克隆》P826 8、5-10秒离心，弃除上清，用50ul蒸馏水重悬沉淀。加入
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