15%SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(0.75mm)
储存条件:2-8 ℃,有效期 1 年。
产品货号及品名:
注:0.75mm 厚 mini 胶可制 125 块;1.00mm 厚胶可制 90 块;1.50mm 厚胶可制 60 块。
产品组成:
注意:
1. (APS)为结晶性粉末,2-8 ℃储存,使用前每支加入 1 mL 蒸馏水即为 10% APS 溶液,现配现用最佳,溶液用后-20 ℃可储存 2 个月。APS 如出现严重结块,即已变质。
2. 本试剂盒制胶液无需添加 TEMED。如需加快成胶,也可按 1‰补加 TEMED(本试剂盒不提供)。
产品简介:
系列固定浓度 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒,仅包含 APS,5%浓缩胶制胶液,及单一浓度的分离胶制胶液三种试剂。APS 为固体粉末形态,且为小包装多支,便于储存和配制;分离胶及浓缩胶制备仅需相应的制胶液与 10% APS 溶液按 100:1 混合,依次注入制胶模具成胶即可,无需自备试剂,尤其是无需添加 TEMED,既安全环保,又便于快速制胶;浓缩胶制胶液内已加入红色染料,便于准确上样,且实验证明该染料对电泳及后续实验无不良影响。但请注意该系列制胶试剂盒只可用于单一分离胶浓度SDS-PAGE 胶的制备,请根据“产品货号及品名”选择相应货号产品。如需小量制备多种浓度分离胶请选购 SK6010 产品。
操作步骤:(以 0.75mm 厚 mini 胶为例)
一、灌制分离胶
1.参照制胶模具说明,装配好模具。
2. 取分离胶制胶液 4 mL,按 1%加入 40 μL 10% APS 溶液,吹打混匀,避免产生气泡。
3. 注入模具(留少许以判断凝胶状态),通过抽真空或者吸水滤纸去除气泡,凝胶混合液加至距前玻璃板顶端约 1.5 cm 或距梳齿 0.5 cm,轻轻加入 1 mL 水覆盖封胶,使分离胶表面保持平整。
4. 静置 30-60 分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表明凝胶已聚合。
二、灌制浓缩胶
1. 倒掉分离胶上的水层。
2. 取浓缩胶制胶液 1 mL,按 1%加入 10 μL 10% APS 溶液,吹打混匀,避免产生气泡。
3. 注入模具的分离胶的上面(留少许以判断凝胶状态),通过抽真空或者吸水滤纸去除气泡,至前玻璃板的顶端。
4. 插入梳子,避免产生气泡。
5. 静置 30-60 分钟,待上层凝胶聚合后,小心地拔出梳子,避免破坏加样孔。
6. 进行常规电泳操作。使用 Tris 甘氨酸电泳液建议电泳条件:初始电压 80V,约 30 分钟,样品进入分离胶后,电压调至 120V,约 1 小时,样品抵达凝胶底部停止电泳。
注意事项:
1. APS 溶液常温不稳定,取用后立即放回-20 ℃冰箱;若发现凝胶时间延长,应更换 APS 溶液。
2. PAGE 凝胶的凝聚速度受温度影响,室温较低时,可以增加 50%-100%的 APS 使用量。
3. 在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。
4. 在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作,加水时速度不能太快。
5. 具有神经毒性,操作时请穿戴实验服和一次性手套。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!