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- KA&M-BIO
- Rab(L)3458
- 2025年07月11日
- WB; IHC; ICC.
- Pan-species (General)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 形态：
Liquid
- 保存条件：
负20℃
- 标记物：
辣根过氧化物酶标记
- 适应物种：
Pan-species (General)
- 保质期：
Aliquot and store at -20ºC for 12 months
- 应用范围：
WB; IHC; ICC.
- 浓度：
200μg-1mg/ml
- 抗体英文名：
HRP-Linked Polyclonal Antibody to Androsterone (ADT)
- 规格：
20-100μl
[ PROPERTIES ]
Source: Antibody labeling
Purification: Antigen-specific affinity chromatography followed by Protein A affinity chromatography
Label: HRP
Original Antibody: Rab(P)12288
Traits: Liquid
Concentration: 0.5mg/ml
UOM: 200μl
Cross Reactivity: Mouse; Rat
Applications: WB; IHC; ICC.
[ APPLICATIONS ]
Western blotting: 0.5-3μg/mL
Immunohistochemistry: 5-30μg/mL
Immunocytochemistry: 5-30μg/mL
Optimal working dilutions must be determined by end user.
[ FORMULATION ]
Form & Buffer: Supplied as solution form in 0.01M PBS, pH7.4, containing 0.05% Proclin-300,
50% glycerol.
[ STORAGE AND STABILITY ]
Storage: Avoid repeated freeze/thaw cycles.
Store at 4ºC for frequent use.
Aliquot and store at -20ºC for 12 months.
公司所有产品仅供科研，不作临床诊断、医药或者其他用途。
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文献和实验（1）缓冲体系。纯化后的抗体必须处于一个相对接近体液的缓冲体系中，一般的PBS体系就足够了。注意不要引入高浓度的离子，尤其是金属离子。不要引入干扰抗体实验的离子或基团。 （2）防腐剂。为了防止抗体长菌，必须加入防腐剂，常见的防腐剂有：叠氮钠、硫柳汞、抗生素（庆大霉素）。叠氮钠的常用浓度是0.02%，硫柳汞和庆大霉素的常用浓度为0.01%，其中叠氮钠会抑制HRP酶活性，因此在需要偶联HRP酶的抗体中不能加这种防腐剂，而且叠氮钠会影响细胞色素氧化酶活性，会干扰机体的呼吸作用，因此操作时需要注意
100ul，第二孔加入阳性参照液100ul，第三孔加入1:500的待测抗血清，后续各孔在此基础上倍比稀释，于37℃孵育1 小时。3.6倒掉液体，用洗涤液洗板三次，拍干。每孔加入100ul的HRP标记的小鼠抗兔IgG（1：2000稀释），于37℃孵育45分钟。3.7倒掉液体，用洗涤液洗板三次，拍干。每孔加入100ul的TMB底物（Sigma 单组份TMB ）37℃孵育5—20分钟(根据颜色深浅来决定显色的时间)。3.8每孔加入50ul的终止液（2N H2SO4），在酶标仪上读取波长450nm处的吸光
过氧化物酶）、蛋白质属性（分子量大小）选择适当的封闭物及缓冲液（PBS 或 TBS）。 五、杂交 封闭后，目标蛋白便与特异性的一抗进行免疫反应，一抗可以是标记的，也可以是非标记的。标记的一抗与免疫原结合后，可直接进行检测（直接法），降低了背景和非特异性结合，但信号较弱。非标记的一抗配合标记的二抗使用（间接法），对信号有级联放大作用，可以增加灵敏性和信噪比。二抗既可标记放射性同位素，也可标记染料或其他分子，或与酶偶联。常用的酶包括碱性磷酸酶（AP）和辣根过氧化物酶（HRP），通过与底物反应产生
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