
毕赤酵母残留DNA检测试剂盒(qPCR-探针法)
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- 中国
- 2025年07月16日
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睿科生化科技(广东)有限公司
生物制品残留的宿主细胞DNA会带来免疫原性、致瘤性和传染性的风险,探针杂交法和荧光染料法已不能满足产品质量控制的要求,正逐步被发达国家药典淘汰。睿科毕赤酵母残留DNA检测试剂盒采用Taqman探针荧光定量PCR原理,可以定量检测生物制品样本中残留的毕赤酵母宿主细胞DNA。本试剂盒可与睿科生物制品宿主细胞残留DNA前处理试剂盒配合使用,对样本中残留的毕赤酵母细胞微量DNA进行准确定量分析。
优势特点
■ 特异性强、结果准确、重复性好
■ 宽线性范围,灵敏度达到fg级别
■ 与《中国药典》2020年版,《美国药典》43版,《欧洲药典》10.0版方法一致
■ 依据法规完成全面的方法学验证
■ 组分简单,操作简便快捷
应用领域
■ 生物制品质量控制
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文献和实验(例如基线期默认 3 - 15 个循环,改为 3 - 10 个循环),重新分析数据,一般都能得到一个比较好的结果。 (3)个别扩增曲线骤降 这是比较常见的一个问题,反应管内若留有气泡,温度升高后会导致气泡破裂,使仪器检测到的荧光值突然降低。所以大家进行扩增反应之前,一定要仔细检查反应管内是否有气泡残留。 (4)扩增曲线呈锯齿状且不连续 这个可以参考上图,这是典型的 ROX 添加不当导致的异常结果,曲线杂乱。大家首先可以尝试去掉 ROX 分析数据,看一下重复性是否 OK(复孔间
是由于体系内引物与引物纠缠比引物与模板结合更容易导致的,可以尝试提高模板浓度、退火温度或者降低引物浓度来进行改善; 另外,当目的基因表达量极低时,染料法容易形成引物二聚体产物影响实验结果,此时,建议使用探针法定量。 (2)杂峰在主峰之后,非引物二聚体 上图这种情况就是非特异性扩增,可能是引物特异性不好引起的,也可能是空气中有气溶胶污染所导致。 大家可以先增加退火温度再试试看,如果没有改善,那么就需要重新更换引物啦。为了避免这种麻烦,小 V 建议大家在进行 qPCR 实验之前,就对自己的引物
实时荧光定量 PCR 技术(Quantitative Real-time PCR,简称 qPCR)是在 PCR 扩增过程中,通过实时监测荧光信号的变化,达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断,动物疾病监测,食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延,qPCR 技术更是因其检测通量高,速度快,操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果,我们需要注意哪些方面呢?其实决定一次实验成功
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