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0.1M亚精胺溶液(过滤除菌,
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50
0.1M Spermidine Solution
一年
上海博尔森生物科技有限公司
-20℃
50mL
0.1M亚精胺溶液(过滤除菌,基因枪转化)
储存条件:-20℃保存,有效期一年。
产品组成:
产品简介:
0.1M 亚精胺溶液(过滤除菌),为客户下单之后新鲜配置的无菌溶液。氯化钙溶液(2.5mol/L,无菌),为经过过滤之后高压灭菌的无菌溶液。
一般此浓度的亚精胺和氯化钙用于基因枪转化法转基因实验。
亦可用于其他实验的高浓度储备液。
操作步骤:
1. 在进行实验前,至少培养样品 30 天,这样确能保叶片大于 5×6 cm2。
2. 根据以下步骤制备 DNA-金粉混合液:
a. 将金粉微粒中加入充足的无菌蒸馏水。
b. 使用 100%乙醇对金粉微粒进行三次洗涤并弃去浮层。
c. 加蒸馏水使金粉微粒重新悬浮。
d. 将准备好的 DNA 溶液(1μg/μl)添加到金粉微粒溶液中,形成浓度为 1μg DNA / 0.6mg 金粉微
粒悬浊液。
e. 剧烈摇晃微离心管使得样品混合均匀。
f. 滴入适当体积的 0.1M 亚精胺和 2.5M CaCl2 进入试管,同时不断剧烈地摇晃。
g. 继续摇晃一分钟以上。
h. 用 100%EtOH 进行三次洗涤,并弃去浮层。
i. 重新使 DNA 包裹的金粒子悬浮于 100%的 EtOH 中。
3. 按照说明书中要求的,讲 UTS-10 安装到 GDS-80 系统上,并设置 40-50 psi 的传递压力。
4. 调整距离量尺至 6-8 cm 的传递距离。
5. 把四爪叶片夹夹到目标叶上,用手调螺栓将其拧紧固定。
6. 将等分 10μl DNA 混匀悬浊液倒入样品装载孔中。
7. 对叶片标本进行轰击。
8. 培育植株三天以上,通过使用 CRi MaestroTM 的体内成像系统观察荧光结果。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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