- ￥578
- 博尔森/BIOESN
- BES20822KB
- 中国
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
0.1M Spermidine Solution
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50mL
0.1M亚精胺溶液（过滤除菌，基因枪转化）
储存条件：-20℃保存，有效期一年。
产品组成：
产品简介：
0.1M 亚精胺溶液（过滤除菌），为客户下单之后新鲜配置的无菌溶液。氯化钙溶液(2.5mol/L,无菌)，为经过过滤之后高压灭菌的无菌溶液。
一般此浓度的亚精胺和氯化钙用于基因枪转化法转基因实验。
亦可用于其他实验的高浓度储备液。
操作步骤：
1. 在进行实验前，至少培养样品 30 天，这样确能保叶片大于 5×6 cm2。
2. 根据以下步骤制备 DNA-金粉混合液：
a. 将金粉微粒中加入充足的无菌蒸馏水。
b. 使用 100％乙醇对金粉微粒进行三次洗涤并弃去浮层。
c. 加蒸馏水使金粉微粒重新悬浮。
d. 将准备好的 DNA 溶液（1μg/μl）添加到金粉微粒溶液中，形成浓度为 1μg DNA / 0.6mg 金粉微
粒悬浊液。
e. 剧烈摇晃微离心管使得样品混合均匀。
f. 滴入适当体积的 0.1M 亚精胺和 2.5M CaCl2 进入试管，同时不断剧烈地摇晃。
g. 继续摇晃一分钟以上。
h. 用 100％EtOH 进行三次洗涤，并弃去浮层。
i. 重新使 DNA 包裹的金粒子悬浮于 100%的 EtOH 中。
3. 按照说明书中要求的，讲 UTS-10 安装到 GDS-80 系统上，并设置 40-50 psi 的传递压力。
4. 调整距离量尺至 6-8 cm 的传递距离。
5. 把四爪叶片夹夹到目标叶上，用手调螺栓将其拧紧固定。
6. 将等分 10μl DNA 混匀悬浊液倒入样品装载孔中。
7. 对叶片标本进行轰击。
8. 培育植株三天以上，通过使用 CRi MaestroTM 的体内成像系统观察荧光结果。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验步骤：1. 在进行实验前，至少培养样品 30 天，这样确能保叶片大于 5×6 cm2。2. 根据以下步骤制备 DNA-金粉混合液： a. 将金粉微粒中加入充足的无菌蒸馏水。 b. 使用 100％ 乙醇对金粉微粒进行三次洗涤并弃去浮层。 c. 加蒸馏水使金粉微粒重新悬浮。 d. 将准备好的 DNA 溶液（1μg/μl）添加到金粉微粒溶液中，形成浓度为 1 μg DNA / 0.6 mg 金粉微粒悬浊液。 e. 剧烈摇晃微离心管使得样品混合均匀。 f. 滴入适当体积的 0.1M 亚精胺和 2.5M
，充分震荡 3-5min，静置 15min；12000rpm 离心 30s，然后去上清；加 1ml 无菌水重悬；12000rpm 离心 15s，然后去上清；酒精和灭菌 ddH2O 重复上述步骤洗涤 5-7 次；将金粉悬浮于 500μl 灭菌 ddH2O 中，于 4℃或者室温下保存。 （3）质粒的处理：取 100μl 金粉悬浮液，将含有 CA 基因的质粒 10μl（1mg/ml）溶液加到金粉悬浮液中；事先配好 0.1M 亚精胺、2.5MCaCl2以及冰浴无水乙醇；逐滴加入 40μl0.1M 亚精胺
基因枪法一直被认为是最直接、应用范围最广的外源基因导入技术。但由于传统基因枪技术需要靠高压气体驱动，这就带来一个问题：被轰击的中心区域由于气体冲击力过大，会导致被轰击区域大量靶细胞死亡，大量的投递被浪费掉，严重制约了基因枪法投递的转化效率。实践中，利用传统高压手持基因枪尝试将potato virus A (PVA; Puurand et al. 1996)病毒转染到烟草中时，发现氦气压力调节至 150 或 200 psi，距离样本 0 cm 时，可以 100% 转染成功，但是由于气压过高，烟草
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