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文献和实验即水饱和的溴酚蓝液。在15ml灭菌离心管中,依次加入以下各种成分:4.0ml 10 × FA buffer3.1ml 甲酰胺2.0ml 100%的甘油720ul 37%的甲醛80ul0.5M的 EDTA (PH 8.0)16ul 水饱和的溴酚蓝100ul DEPC水混匀,分装,-20℃保存,常用放4℃保存。5、1×甲醛变性胶电泳缓冲液(1×running buffer):20 ml 10×FA gel buffer,4.0 ml 37%的甲醛,176 ml水,放入电泳槽中使用,一般在3次电泳结束后需
眼球取血,如果血样有限在试验方案允许的前提下可以取多只小鼠血样混合)。 三、样本编号 样本标号: 组别及样本标号,要在管壁上标注清晰,特别注意6,9的区分,可以使用英文标注。切记提供我司样本清单。 WB、Q-PCR取样及运输注意事项 一、细胞收集及保存 1、贴壁细胞胰酶消化后900转5min离心至管底(非贴壁细胞直接离心),弃上清,将细胞冻存与-80度长期保存,-20度,暂时保存。若用于Q-PCR尽量使用灭菌无RNA酶离心管,trizon或RNA样本保存液中-80度
RNA 抽提比基因组 DNA 抽提要困难得多。事实上,现有的 RNA 抽提方法/试剂,如果用于从培养细胞中抽提 RNA,比抽提基因组 DNA 更方便,成功率也更高。那为什么同样的方法用于组织 RNA 的抽提,总会碰到问题呢? RNase 真的很顽固吗? 刚涉及 RNA 抽提的新手都会听到别人说 RNase 很顽固,用高压灭菌都无法去除其活性。于是在配制 Tris 缓冲液时就遇到了两难的境地。Tris 缓冲液不能用 DEPC 处理,只能用 DEPC 处理过的水配制
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