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文献和实验Fail 。白细胞小于0. 3 ,红细胞小于0. 2 ,血小板小于10 时一般应更换试剂,不要调试仪器。 2. 2 目测检查 将仪器右侧门打开,检查1~5 号稀释/ 计数池是否正常,有无结晶、血凝块,各条管路是否通畅。加样针运 行位置是否准确。如有问题,及时解决处理。每日标本量>100 个时,需用浓缩清洗剂浸泡1~5号池,标本量不足100时,两三天做1次。程序:SERVIE SERVICE →USER →DILUENTER →EXTEND→CLEANIN G,按要求加入3 mL 清洗
; 2)细胞培养质控(Cell Culture QC)/细胞培养优化(Cell Culture Optimization):通过实时动态成像,可生成基于细胞覆盖度和细胞个数的动态生长曲线; 3)监测细胞毒性(Cytotoxicity):将染料和细胞混合然后监测,操作者可离开,是基于染料的实验; 4)监测细胞凋亡(Apoptosis):将凋亡试剂和细胞混合然后监测,操作者可离开,是基于染料的实验; 5)监测报告基因(Reporter
的比值。△Rn:△Rn是Rn扣除基线后得到的标准化结果(△Rn=Rn-基线)。2.影响Ct值的关键因素模板浓度模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个合适范围内,使Ct在15-35之间。反应液成分的影响任何分子的荧光发射都受环境因素影响----比如溶液的pH值和盐浓度。PCR反应的效率PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所产生斜率不同的标准曲线。PCR效率取决于实验、反应混合液性能和样品质量。一般说来,反应效率在90
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