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1年
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上海圻明生物
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2-8°C不超过一个月,-80°C不超过12个月
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Recombinant Follistatin Like Protein 1 (FSTL1)
卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)重组蛋白,恒河猴片段与标签等更多信息欢迎咨询销售商。重组蛋白是应用了重组 DNA 或重组 RNA 技术而获得的蛋白质。重组蛋白已被广泛应用于蛋白结构研究、重组蛋白药物、诊断试剂开发、抗体药物靶点、免疫检测试剂等研究领域。用于生产重组蛋白的宿主细胞主要是细菌 (大肠杆菌)、哺乳动物细胞、昆虫细胞和酵母。
卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)重组蛋白,恒河猴热稳定性由目标蛋白的损失率来描述。损失率采用加速热降解试验测定,即37℃孵育48h,未见明显降解和沉淀。 (参照中国生物制品标准,由阿伦尼乌斯方程计算得出。)在适当的储存条件下,该蛋白质在保质期内的损失小于5%。
重组蛋白何选购?

重组蛋白表达系统一般可以分为:
【原核表达系统】:是指在细菌中表达蛋白质的系统,原核表达系统具有简单、高效、易于扩大规模的优点,广泛用于生产大量纯化蛋白质。原核表达系统可以分为两种类型:大肠杆菌表达系统和其它细菌表达系统,大肠杆菌表达系统是研究最早、最为成熟也最为常用的表达系统。原核表达系统具有成本低、表达量高等优点,但缺乏翻译后修饰机制,不适用于需要糖基化或特定位点切割等修饰的蛋白表达。
【真核表达系统】:是指在真核细胞中表达蛋白质的系统,可以实现不同程度的糖基化等翻译后修饰,更接近于来自真核蛋白的天然活性。真核表达系统可以分为四种类型:酵母表达系统、昆虫表达系统、植物细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统。
【酵母表达系统】:常用的酵母细胞包括酿酒酵母、毕赤酵母等,酵母细胞生长速度快、培养条件简单,既可高密度发酵又可以进行正确的蛋白质折叠和翻译后修饰,是一种良好的蛋白表达系统。该系统可以实现大量表达蛋白质,并且具有易于纯化和高度可控的优点。
【昆虫细胞表达系统】:是一种真核蛋白高表达体系,适合于一些在原核体系难以表达的蛋白,比如膜蛋白、大分子质量蛋白、蛋白激酶等,常用的昆虫表达系统包括杆状病毒表达系统、多角体病毒表达系统。
【无细胞表达系统】:可以从质粒和PCR产物直接表达目的蛋白,表达体系是来自于大肠杆菌、麦胚、兔网织红细胞等的无细胞提取物。无细胞蛋白表达的优点是可自动化表达其它系统难以表达的产物,通量高,但表达量低、成本高昂。
【植物细胞表达系统】:通常使用农杆菌介导的转化方法,将表达载体导入到植物细胞中进行表达。植物细胞具有高效的蛋白质修饰和表达能力,同时还可以进行正确的蛋白质折叠和组装。这种表达系统不仅能够表达蛋白质,还可以进行疫苗和生产重组蛋白质等方面的应用。
【哺乳动物表达系统】:在蛋白的起始信号、加工、分泌、糖基化方面具有独特优势,适合表达完整的大分子蛋白,在活性方面也远胜于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统,但构成复杂、操作技术要求高、表达产量不大、产率低。
考虑融合标签的影响。任何一类标签处于氨基酸序列的任一位置,都具有影响目的蛋白表达或功能的可能性。主要原因是标签可能会干扰蛋白的正确折叠,致使目的蛋白失活或形成包涵体。其次,标签可能会中断亚细胞定位信号,这种情况下,蛋白能够正确翻译和折叠,但在细胞内所处的位置是错误的。因此,您需要知道添加的标签对目的蛋白的表达是否有影响。
考虑是在N-端还是C-端标记。N-端或C-端标记的选择还需要根据蛋白结构、定位等特性。然而,倘若你没有确切的蛋白结构,或蛋白功能域图谱,建议分别构建N-端标记和C-端标记的表达克隆,以检测哪个更有效。
组织蛋白酶B(Cathepsin B)是一种半胱氨酸组织蛋白酶,属于半胱氨酸蛋白酶家族,是一种胞内酶,主要分布于细胞溶酶体中。
在病变情况下,也会分泌到细胞膜外周微环境或者胞外。组织蛋白酶B由一个重链和一个轻链组成的二聚体,具有羧基肽酶和内肽酶活性。
羧基肽酶活性使得组织蛋白酶B可选择性识别某些氨基酸序列以切割序列 C 端侧的肽键接头,例如缬氨酸-瓜氨酸(Val-Cit)、缬氨酸-丙氨酸(Val-Ala)和甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸(GGFG)等。
这些Linker在已获批的ADC中广泛应用,具体裂解过程如图2所示。内肽酶活性则使组织蛋白酶B参与细胞外基质的降解,从而涉及肿瘤的侵袭和转移。

重组蛋白哪里买?上海圻明优势供应重组蛋白欢迎咨询。
重组人组织蛋白酶B(Human Cathepsin B),该产品采用HEK293细胞表达,更接近蛋白天然构象,可用于评估ADC药物连接子切割效果,保证payload在胞内高效释放;
通过测定底物Z-RR-AMC的代谢减少速率来评估组织蛋白酶B的活性。孵育体系中组织蛋白酶B终浓度为2μg/ml,底物Z-RR-AMC终浓度为1μM,孵育时间为60min,最终测得组织蛋白酶B的活性为8000pmol/min/mg。

重组蛋白活性等级
生物活性是蛋白质在生物系统中所产生的反应。某种蛋白质的特定生物活性需经功能实验测定并以ED50来度量,ED50即半数有效量(median effective dose),指能引起50%实验对象出现阳性反应的剂量。并非所有出售的蛋白质都具有经过验证的生物活性,因为某些实验应用并不需要。
生物活性等级
经过生物活性验证的重组蛋白,非常适合细胞培养和功能研究。
生物活性级产品的主要特点包括
通过生物活性验证
哺乳动物、大肠杆菌、昆虫、酵母或小麦胚芽表达
经 SDS-PAGE 验证,具有高纯度(> 90%)
内毒素水平 < 1 EU/μg
大小通过 SDS-PAGE鉴定
标准等级
不具备生物活性的重组蛋白,可用作蛋白质印迹法、流式细胞术和其他实验的标准品。
标准级蛋白的主要特点包括
哺乳动物、大肠杆菌、昆虫、酵母或小麦胚芽表达
采用 SDS-PAGE 分析纯度(> 80%)
大小通过 SDS-PAGE 鉴定
优质生物活性等级
具有最高活性和有效性的细胞因子,非常适合临床前细胞培养和功能研究。这些重组蛋白都通过我们最严格的生产标准。
这些优质级蛋白的主要特点包括
最佳生物活性
哺乳动物表达
经 LC/MS(> 95%)和 SDS-PAGE(> 99%)验证,具有超高纯度
超低内毒素(< 0.005 EU/μg)
大小通过质谱法鉴定
不涉及动物
无载体配方(不含 BSA)
酪胺信号放大技术(Tyramide signal amplification,简称TSA),是一类利用HRP对靶标抗原进行高密度原位标记的酶学检测方法,可以应用于IF/IHC的信号放大。TSA技术主要原理:在过氧化氢H2O2存在时,辣根过氧化物酶HRP可以催化酪胺为一种非常活跃的短寿命中间体,在短时间内,中间体可以共价结合到周围蛋白的富电子表面形成酪胺化复合物,大量富集成以酶为中心的类似“岛”状的聚集团,因使用荧光染料标记的酪胺,使得抗原-抗体结合部位形成大量的荧光素沉积,实现信号放大。
酪胺信号放大技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪胺的信号放大技术能够提供极强的灵敏度、检测极微量的目的抗原。酪胺信号放大技术极大的降低抗体的用量,节约抗体。酪胺信号放大试剂盒可与传统染色方法结合使用以多色成像,也可以顺序进行两个或更多个酪胺反应以标记一个样品上的不同靶标,因此可使用不同的荧光酪胺反复标记实现多重荧光染色。

重组人HIP1R蛋白序列
MNSIKNVPARVLSRRPGHSLEAEREQFDKTQAISISKAINTQEAPVKEKH ARRIILGTHHEKGAFTFWSYAIGLPLPSSSILSWKFCHVLHKVLRDGHPN VLHDCQRYRSNIREIGDLWGHLHDRYGQLVNVYTKLLLTKISFHLKHPQF PAGLEVTDEVLEKAAGTDVNNIFQLTVEMFDYMDCELKLSESVFRQLNTA IAVSQMSSGQCRLAPLIQVIQDCSHLYHYTVKLLFKLHSCLPADTLQGHR DRFHEQFHSLRNFFRRASDMLYFKRLIQIPRLPEGPPNFLRASALAEHIK PVVVIPEEAPEDEEPENLIEISTGPPAGEPVVVADLFDQTFGPPNGSVKD DRDLQIESLKREVEMLRSELEKIKLEAQRYIAQLKSQVNALEGELEEQRK QKQKALVDNEQLRHELAQLRAAQLEGERSQGLREEAERKASATEARYNKL KEKHSELVHVHAELLRKNADTAKQLTVTQQSQEEVARVKEQLAFQVEQVK RESELKLEEKSDQLEKLKRELEAKAGELARAQEALSHTEQSKSELSSRLD TLSAEKDALSGAVRQREADLLAAQSLVRETEAALSREQQRSSQEQGELQG RLAERESQEQGLRQRLLDEQFAVLRGAAAEAAGILQDAVSKLDDPLHLRC TSSPDYLVSRAQEALDAVSTLEEGHAQYLTSLADASALVAALTRFSHLAA DTIINGGATSHLAPTDPADRLIDTCRECGARALELMGQLQDQQALRHMQA SLVRTPLQGILQLGQELKPKSLDVRQEELGAVVDKEMAATSAAIEDAVRR IEDMMNQARHASSGVKLEVNERILNSCTDLMKAIRLLVTTSTSLQKEIVE SGRGAATQQEFYAKNSRWTEGLISASKAVGWGATQLVEAADKVVLHTGKY EELIVCSHEIAASTAQLVAASKVKANKHSPHLSRLQECSRTVNERAANVV ASTKSGQEQIEDRDTMDFSGLSLIKLKKQEMETQVRVLELEKTLEAERMR LGELRKQHYVLAGASGSPGEEVAIRPSTAPRSVTTKKPPLAQKPSVAPRQ DHQLDKKDGIYPAQLVNY
重组人EP300蛋白(N-His标签)序列
ESFPYRTKALFAFEEIDGVDLCFFGMHVQEYGSDCPPPNQRRVYISYLDSVHFFRPKCLRTAVYHEILIGYLEYVKKLGYTTGHIWACPPSEGDDYIFHCHPPDQKIPKPKRLQEWYKKMLDKAVSERIVHDYKDIFKQATEDRLTSAKELPYFEGDFWPNVLEESIKELEQEEEERKREENTSNESTDVTKGDSKNAKKKNNKKTSKNKSSLSRGNKKKPGMPNVSNDLSQKLYATMEKHKEVFFVIRLI
重组人TP53/p53蛋白(N-GST标签)序列
EEPQSDPSVEPPLSQETFSDLWKLLPENNVLSPLPSQAMDDLMLSPDDIEQWFTEDPGPDEAPRMPEAAPPVAPAPAAPTPAAPAPAPSWPLSSSVPSQKTYQGSYGFRLGFLHSGTAKSVTCTYSPALNKMFCQLAKTCPVQLWVDSTPPPGTRVRAMAIYKQSQHMTEVVRRCPHHERCSDSDGLAPPQHLIRVEGNLRVEYLDDRNTFRHSVVVPYEPPEVGSDCTTIHYNYMCNSSCMGGMNRRPILTIITLEDSSGNLLGRNSFEVRVCACPGRDRRTEEENLRKKGEPHHELPPGSTKRALPNNTSSSPQPKKKPLDGEYFTLQIRGRERFEMFRELNEALELKDAQAGKEPGGSRAHSSHLKSKKGQSTSRHKKLMFKTEGPDSD
重组人ATP7B蛋白( N-His标签)序列
TSTVRILGMTCQSCVKSIEDRISNLKGIISMKVSLEQGSATVKYVPSVVCLQQVCHQIGDMGFEASIAEGKAASWPSRSLPAQEAVVKLRVEGMTCQSCVSSIEGKVRKLQGVVRVKVSLSNQEAVITYQPYLIQPEDLRDHVNDMGFEAAIKSKVAPLSLGPIDIERLQSTNPKRPLSSANQNFNNSETLGHQGSHVVTLQLRIDGMHCKSCVLNIEENIGQLLGVQSIQVSLENKTAQVKYDPSCTSPVALQRAIEALPPGNFKVSLPDGAEGSGTDHRSSSSHSPGSPPRNQVQGTCSTTLIAIAGMTCASCVHSIEGMISQLEGVQQISVSLAEGTATVLYNPSVISPEELRAAIEDMGFEASV
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文献和实验内源性FSTL1 通过激活钠‐钾泵引起膜超极化调节痛觉信息传递
‐钾泵活性;然而,人体内是否存在钠‐钾泵的内源性的激动剂还不清楚。 近日,中科院上海生科院神经所张旭实验室通过对背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)的研究,发现在 DRG 中有一种选择性高表达的蛋白——滤泡素抑制素样蛋白 1(Follistatin‐like 1,FSTL1)能通过清亮小泡运输至脊髓内的传入神经末端释放,并直接与传入神经末端突触前膜上的钠‐钾泵 α1 亚基相结合,增强钠‐钾泵活性,使细胞膜超极化,从而对传入神经末端的兴奋性突触传递起抑制
(HIC)反相(RPC) 特异性结合 亲和(AC) 每一种方法都有分辨率、处理量、速度和回收率之间的平衡。 分辨率:由选择的方法和层析介质生成窄峰的能力来实现。总的来说,当杂质和目标蛋白性质相似时,在纯化的最后阶段分辨率是重要因素。 处理量:一般指在纯化过程中目标蛋白的上样量。如上样体积、浓度等。 速度:在初纯化中是重要
概要 对于基因工程技术构建的重组蛋白,通常分为可溶性重组蛋白和不溶性重组蛋白,可溶性的重组蛋白一般常常存在于细胞质内、细胞分泌到培养基、分泌到周质间隙中等。不可溶性的蛋白主要是由于表达系统的高效表达,在细胞内形成了包涵体。E.coli是应用最为广泛的重组蛋白质表达系统,但是表达的外源性蛋白多以包涵体的形式存在,为了重新获得生物活性,需要对包涵体蛋白质进行体外变复性操作。 蛋白质复性模型 根据对蛋白质折叠过程的研究,目前科学家已提出多种蛋白质复性模型,折叠漏斗模型是目前被广泛认可
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