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999
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1年
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上海圻明生物
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2-8°C不超过一个月,-80°C不超过12个月
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Recombinant Apolipoprotein H (APOH)
载脂蛋白H(APOH)重组蛋白,牛片段与标签等更多信息欢迎咨询销售商。重组蛋白是应用了重组 DNA 或重组 RNA 技术而获得的蛋白质。重组蛋白已被广泛应用于蛋白结构研究、重组蛋白药物、诊断试剂开发、抗体药物靶点、免疫检测试剂等研究领域。用于生产重组蛋白的宿主细胞主要是细菌 (大肠杆菌)、哺乳动物细胞、昆虫细胞和酵母。
重组蛋白何选购?
考虑融合标签的影响。任何一类标签处于氨基酸序列的任一位置,都具有影响目的蛋白表达或功能的可能性。主要原因是标签可能会干扰蛋白的正确折叠,致使目的蛋白失活或形成包涵体。其次,标签可能会中断亚细胞定位信号,这种情况下,蛋白能够正确翻译和折叠,但在细胞内所处的位置是错误的。因此,您需要知道添加的标签对目的蛋白的表达是否有影响。
考虑是在N-端还是C-端标记。N-端或C-端标记的选择还需要根据蛋白结构、定位等特性。然而,倘若你没有确切的蛋白结构,或蛋白功能域图谱,建议分别构建N-端标记和C-端标记的表达克隆,以检测哪个更有效。
组织蛋白酶B(Cathepsin B)是一种半胱氨酸组织蛋白酶,属于半胱氨酸蛋白酶家族,是一种胞内酶,主要分布于细胞溶酶体中。
在病变情况下,也会分泌到细胞膜外周微环境或者胞外。组织蛋白酶B由一个重链和一个轻链组成的二聚体,具有羧基肽酶和内肽酶活性。
羧基肽酶活性使得组织蛋白酶B可选择性识别某些氨基酸序列以切割序列 C 端侧的肽键接头,例如缬氨酸-瓜氨酸(Val-Cit)、缬氨酸-丙氨酸(Val-Ala)和甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸(GGFG)等。
这些Linker在已获批的ADC中广泛应用,具体裂解过程如图2所示。内肽酶活性则使组织蛋白酶B参与细胞外基质的降解,从而涉及肿瘤的侵袭和转移。

重组人组织蛋白酶B(Human Cathepsin B),该产品采用HEK293细胞表达,更接近蛋白天然构象,可用于评估ADC药物连接子切割效果,保证payload在胞内高效释放;
通过测定底物Z-RR-AMC的代谢减少速率来评估组织蛋白酶B的活性。孵育体系中组织蛋白酶B终浓度为2μg/ml,底物Z-RR-AMC终浓度为1μM,孵育时间为60min,最终测得组织蛋白酶B的活性为8000pmol/min/mg。

载脂蛋白H(APOH)重组蛋白,牛热稳定性由目标蛋白的损失率来描述。损失率采用加速热降解试验测定,即37℃孵育48h,未见明显降解和沉淀。 (参照中国生物制品标准,由阿伦尼乌斯方程计算得出。)在适当的储存条件下,该蛋白质在保质期内的损失小于5%。
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文献和实验【转帖】教你一种简单、高效的提高重组蛋白质的诱导表达量的方法
相信如何提高目的重组蛋白的诱导表达量是很多同学在研究中都会遇到的问题。记得小编在读书的时候就经常在研究这个问题,泡了无数论坛,看了无数帖子,尝试过IPTG的诱导浓度、培养基成分、诱导温度、诱导时间,甚至让别的公司帮忙做密码子优化(将目的片段通过全基因合成的方式合成出来)。总的来说,提高IPTG浓度是可以提高目的蛋白的诱导表达量的,但一般也就用到1mM的浓度,再高对细胞有毒性; 培养基营养越丰富,表达量越高,所以如果追求表达量的话,就不要用LB培养基了,用自动诱导培养基吧; 诱导温度,温度越低
【进展|热点】曹雪涛Nature Immunology又发牛文!!!
Nat Immunol. 2011 May;12(5):416-24. Epub 2011 Mar 27. Intracellular MHC class II molecules promote TLR-triggered innate immune responses by maintaining activation of the kinase Btk Liu X, Zhan Z, Li D, Xu L, Ma F, Zhang P, Yao H, Cao X
(1 M DTT ) 150 µL Total 1.5 L 3) 4℃透析至少 3 h 以上,换新的透析液继续透析 3 h 以上; 4) 按上步骤制备透析液,但不加 DTT; 5) 用不加 DTT 的透析液再透析一次。
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