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Rnase Free DNas
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50
Rnase Free DNase I
3年
上海博尔森生物科技有限公司
-20°C
1000U/10KU
描述:本酶是将单链或双链 DNA 同等程度的随机分解,生 成具有 5′-P 末端寡核苷酸的脱氧核糖核酸内切酶。由于 RNase-free DNase I 中 Protease 已几乎被完全去除,从而 提高了该酶在 pH 中性区域的稳定性。此外该酶中添加了 Rnase Inhibitor,用于抑制 RNA 样品中残留的 RNase 核酸 酶,因此可以有效抑制 RNA 提取过程中 Rnase 酶对 RNA 的降解。Stop Buffer 终止反应后,可通过一步加热失活 DNase I 活性
活性定义以小牛胸腺 DNA 为底物,在 25℃、pH5.0 的条件下,1 分钟内使反应液的 260 nm 吸光度增加 0.001 所需要的酶量定义为 1 个活性单位(Kunitz Unit)。纯度10 U 的本酶和 1 μg 的 16S, 23S rRNA 在 37℃、pH7.5 的条件下反应 1 小时,RNA 的电泳谱带不发生变化应用:去除 RNA 样品中的 DNA 污染。储存:-20°C 可保存 2 年。操作方法(去除 RNA 中的基因组 DNA 污染)1. 按以下组分配制反应体系RNA 10~50 μg10× RD Buffer 5 μlRnase Free DNase I (10 U/μl) 1 μl*Rnase Free H2O Up to 50 μl*若 RNA 样品中含有超过 5 μg 基因组 DNA 污染,请使用2 μl 该酶。2. 37°C 孵育 10min 以消化去除基因组 DNA。3. 孵育完毕后加入 5 μl 10× RD Stop Buffer,混合均匀室温放置 1min,并置于 75°C 10min 加热失活 DNase I。样品可直接用于下一步反转录等试验。注意:1)通常加热方法即可失活 DNase I。如需要去除残留的变性蛋白,可在 37°C 消化完毕后使用酚氯仿抽提并沉淀 RNA样品(不进行加热操作)。2)10× RD Stop Buffer 中含有螯合剂用于去除二价阳离子,进行加热失活前,必须加入 5 μl 10× RD Stop Buffer 并混合均匀,再进行热失活,否则会导致 RNA 降解。3)处理完毕的 RNA 样品进行一步反转录反应时,添加量需要<20%(如 20 μl 的反转录体系中加入量要<4 μl)特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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