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文献和实验本法反应温和,对抗原、抗体免疫活性影响小,已被广泛应用。缺点是标记率较低,一般为20~40%。 1.原理此法是利用乳过氧化物酶(Lactoperoxidase)有促进微量过氧化氢对125I-的氧化作用,生成125I+,并标记在多肽、蛋白质酪氨酸分子上。 2.方法以标记蛋白质抗原为例。 (1)反应液组成:蛋白质2~5μg溶于磷酸缓冲液10~25μl中,加入Na125i 1m Ci(10μl)、乳过氧化物酶溶液25ng(10μl)、H2O2200ng(10μl
本法反应温和,对抗原、抗体免疫活性影响小,已被广泛应用。缺点是标记率较低,一般为20~40%。 1.原理此法是利用乳过氧化物酶(Lactoperoxidase)有促进微量过氧化氢对 125 I - 的氧化作用,生成 125 I + ,并标记在多肽、蛋白质酪氨酸分子上。 2.方法以标记蛋白质抗原为例。 (1)反应液组成:蛋白质2~5μg溶于磷酸缓冲液10~
溶剂可以提取脂质或减少折射率的变化 [4, 5, 16],但同时会猝灭荧光,从而限制了成像时间。此外,BABB 中天然荧光的不稳定性限制了精细神经元投射或其他易于淬灭的信号的成像。所以 BABB 等有机法由于上述缺点如今已不常使用。5. iDISCO+iDISCO+是基于 DISCO 和 3DISCO 方法的改进版本(图 6)。iDISCO+也是一种用化学试剂浸泡使组织透明的方法,与之前介绍的方法不同的是,iDISCO+先对组织进行脱水和免疫染色,之后再清除组织中的脂质使组织透明(图 7)。先用甲醇梯度
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