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云萃
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文献和实验管(2ml、5ml、10ml),高速台式离心机,分光光度计,微量进样器,荧光灯(反应试管处光照强度为4000lx);刻度吸管,G3垂熔玻璃漏斗等。 二、方法步骤 (一)田间直接鉴定 当土壤干旱来临时,尤其在小麦孕穗至灌浆阶段发生旱性时,植株因失水而逐渐萎蔫,叶片变黄并干枯。在午后日照最强、温度最高的高峰过后根据小麦叶片萎蔫程度分5级记载。级数越小,抗旱性越强。 “1”级 无受害症状; “2”级 小部分叶片萎缩,并失去应有光泽
列的质量评估工作,证明了提取环境样品DNA的过程中使用IRT技术的重要性。一篇总结性文章曾发表于ASM 2010年年会(可致电:0755-8348 9872索取)。使用含IRT技术的MO BIO PowerSoil® DNA Isolation Kit,与不含IRT技术的竞争品牌试剂盒,提取0.1g堆肥做对比试验。最终DNA用分光光度法和凝胶电泳分析作初步分析,然后用通用引物16S rRNA,KAPA2G Fast HotStartReadymix酶跑end-point PCR。下图(图3A)展示
的PCR级水,室温离心30 s(10000 g); 16) 弃柱,管中DNA即可用于下一步实验,建议贮存于-20℃至-80℃。 2. DNA的分光光度计检测 将4种纯化方法纯化后的土壤DNA各取20µL,用蒸馏水稀释至400µL。以蒸馏水做空白,在UV-754紫外分光光度计上测定OD 260, OD 280, OD 230三个数值。根据核酸定量经验公式计算DNA含量: 对于纯DNA,1个OD 260 =50g/ml DNA,因此DNA含量应为
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