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无锡云萃生物
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| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥100.0 |
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云萃
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文献和实验后续实验的进行。 小编以前做实验的时候一般是选用 Nanodrop 仪器进行检测,该仪器使用非常方便,不需要对样品进行稀释,并且具有非常宽的 RNA 测量范围。还有一些同学会使用传统紫外分光光度法或者梯度点样用琼脂糖凝胶电泳进行粗略检测,但这两种方法不仅准确度较低,而且紫外分光光度法对样本的消耗也较大,并不是很推荐哦。 2. 去除基因组 DNA 的污染很重要 RNA 中存在的基因组 DNA(gDNA)污染可能是最终 PCR 反应中假阳性结果出现的原因。一方面我们可以通过设计跨内含子的引物去除
在260nm和280nm的紫外线吸收值的比值(A260/A280)估计核酸的纯度。DNA的比值为1.8,RNA的比值为2.0。若DNA比值高于1.8,说明制剂中RNA尚未除尽。RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。当然也会出现既含蛋白质又含RNA的DNA溶液比值为1.8的情况,所以有必要结合凝胶电泳 等方法鉴定有无RNA。或用测定蛋白质的方法检测是否存在蛋白质。紫外分光光度法只用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液。对于很稀的溶液可采用荧光光度法
DNA 的ε(ρ)= 6 000 - 8 000 RNA 的ε(ρ)= 7 000 -10 000 含1μg /mL RNA 溶液的光密度为0.022~0.024。采用紫外分光光度法测 定核酸含量时,通常规定:在260nm 波长下,浓度为1μg/mL 的DNA 溶液 其光密度为0.020,而浓度为1μg/mL 的RNA 溶液其光密度为0.024。因此, 测定未知浓度的DNA(RNA)溶液的光密度OD260
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