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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
pCMV-SPORT6-C17orf45
- 保质期:
90天
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
质粒干粉
产品名称:pCMV-SPORT6-C17orf45质粒
别称:BC040159.1;MGC40157
产品规格:质粒干粉
有效期:90天,请尽快转化。
保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
运输方式:常温运输,1周内。
应用领域:科研
复制子:pUC
感受态:DH5a
培养温度:37度
质粒宿主:大肠杆菌
质粒用途:基因模板
注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)


使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
| pFUPI AoT5Cyp猫头鹰猴基因质粒 |
| pPH37酵母基因质粒 |
| pET28a-PPK大肠基因质粒 |
| pTXB1-Tn5大肠基因质粒 |
| pAX01-PPK大肠基因质粒 |
| pMA2775大肠基因质粒 |
| pdnaKp-EGFP大肠启动子质粒 |
| pcDNA-4mtD3cpv基因质粒 |
| pBAV1k-T5-LUX基因质粒 |
| pTE-10M0X其它基因质粒 |
| pSR58.6蓝藻基因质粒 |
| pTA7002-avrPto番茄基因质粒 |
| pE6c荧光基因质粒 |
| pSK+KanaRpsL抗性基因质粒 |
| pCY 3010-07抗性基因质粒 |
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文献和实验),绿色荧光蛋白(GFP),荧光素酶(Lux或Luc)以及b-半乳糖苷酶(b-gal)。可以使用简单的非同位素方法检测b-gal的表达以测定转染效率和活性。pCMV SPORT- bgal质粒包含CMV启动子调控下的LacZ基因,转染入真核细胞内后可以直接表达bgal。结合简单的检测步骤,可以做为监测转染条件的一种方便灵敏的方法。 09稳定转染细胞系的筛选 用载体中所含的选择标志进行筛选是建立稳定转染细胞系最常用的方法。抗生素抗性基因可以与目的基因在同一个质粒上,也可以在不同的质粒上。如果两个不同
的克隆方法将目的基因克隆进入门载体。 (2)混合包含目的基因的入门克隆和合适的目的载体以及Gateway LR Clonase酶,构建表达克隆。(表达克隆用来在合适的宿主中进行蛋白的表达和分析。) 有几种方法可以构建Gateway入门克隆。无论您选择何种方法,创建的入门克隆都是准备用来与各种目的载体进行重组。 (1)PCR克隆(定向TOPO克隆至入门载体或与供载体B×P重组) (2)限制性内切酶消化和连接进入入门载体 (3)使用pCMV•SPORT6或pEXP-AD502*构建
,所有的5个Gateway?入门载体提供了Kozak 序列。此外,pENTR?11提供了SD (Shine-Dalgarno)序列,便于在大肠杆菌中有效的翻译。C Gateway?改造过的cDNA文库如果您已经有了用Gateway兼容载体构建的cDNA文库,您就可以通过pDONRTM载体和BP ClonaseTM酶混合物进行一个简单的重组反应,很容易地把单个克隆转换成Gateway?入门克隆。这样就不再需要亚克隆和测序,为您节约数小时的时间。SuperScript cDNA文库使用pCMV·SPORT构建,有几种










