- ￥950
- YLKBIO
- YLK-ZL0153
- 国产
- 2026年01月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
pET-32a(+)-E-protein plasmid
- 保质期：
90天
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
质粒干粉
产品名称：pET-32a(+)-E-protein质粒
产品规格：质粒干粉
有效期：90天，请尽快转化。
保存温度：一般在-20℃，置于-80℃保存时间更长。
运输方式：常温运输，1周内。
应用领域：科研
生长条件：LB+氨苄青霉素，37℃，克隆菌株BL21(DE3)
注意事项：转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。（请向客服QQ索要质粒信息目录）
1.溶解： 收到质粒干粉后，请加入 20μl 无菌水至管底，溶解质粒，室温静置 1min；
2.混合（吸附质粒）： 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀，冰上放置 30min；
3.热激导入： 42℃静置 90s；
4.收缩膜孔： 冰浴 2min；
5.修复培养： 毎管加 800μl LB 液体培养基，37 ℃培养 1h 150 r/min；
6.筛选培养： 将适当体积（100 μl）的复苏细胞，涂布在相应抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（琼脂面务必干燥后）， 倒置培养 12-16h，出现菌落。
7.提取： 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中，震荡培养 12-16h，根据试验需要提取质粒。
pET-32a(+)-E-protein质粒培养基：LB+50mcg/ml氨苄青霉素：酵母膏 5.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 10.0g，蒸馏水 1.0L，pH 7.0。121℃，15min灭菌。灭菌结束后，培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素，浓度50mcg/ml。
| pCMV-SPORT6-CDC23（11-1794bp）人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-SHPK人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-NUFIP1人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-SLC2A6人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-ANKRA2人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-HNF1B人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-SLC39A3人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-AKAP7人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-MRPS11人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-YIPF6人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-TMOD3人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-CXCL6人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-C4orf18人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-SMAD2人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-SAV1人源基因质粒 |
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文献和实验素的抗性基因，不特指多位Ampr（试一试）。 无论选用哪种载体，首先都要获得载体分子，然后采用适当的限制酶将载体DNA进行切割，获得分子，以便于与目的基因片段进行连接。pET32a(+)自身载体表达的片段大小 The expected fusion protein expressed encoded by just the pET-32a(+) vector alone would be around 20.4 kDa. The Trx-tag
都不成问题，而且可以下到表达系统操作手册，原核表达看完 pET 表达系统操作手册，真核系统看完毕赤酵母表达系统。 方法四：如何查找改造过的质粒的质粒图谱 有些质粒是经过改造的，所以通过上述方法不能查询到相应信息。这时可以在 google scholar 中输入质粒名称，可以直观地看哪些学者在何文章中使用了该质粒，从而可了解到质粒的来源；或者籍此向作者咨询或索取。 另外介绍下如何通过文献查找经过改造的质粒的图谱信息:Kuhlman, T. E. and E. C. Cox
编码区的基因片段，其由5'末端的stat密码子（ATG）和3'末端的终止密码子（TAA，TAG或TGA）结合。然后将目的基因片段插入pMD18-T载体中以构建重组质粒，通过DNA测序鉴定。用指定的酶消化重组pMD18-T质粒，并通过以下方案将检索到的目的DNA片段亚克隆到pET-32α（+）载体中以产生重组表达载体。将约129bp的TBO基因片段插入pET-32α（+）载体（5900bp）用相同的限制酶在37℃消化pET-32α（+）载体和重组pMD18-T载体1小时，然后通过在65℃温育10分钟
