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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
pKK232-8
- 保质期:
90天
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
质粒干粉
产品名称:pKK232-8大肠pKK系列表达质粒
产品规格:质粒干粉
有效期:90天,请尽快转化。
保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
运输方式:常温运输,1周内。
应用领域:科研
生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,5094bp)
注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)


1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀,冰上放置 30min;
3.热激导入: 42℃静置 90s;
4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
5.修复培养: 毎管加 800μl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
6.筛选培养: 将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
pKK232-8大肠pKK系列表达质粒培养基:LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。
| pCMV-SPORT6-CDC23(11-1794bp)人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-SHPK人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-NUFIP1人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-SLC2A6人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-ANKRA2人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-HNF1B人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-SLC39A3人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-AKAP7人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-MRPS11人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-YIPF6人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-TMOD3人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-CXCL6人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-C4orf18人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-SMAD2人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-SAV1人源基因质粒 |
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文献和实验相关专题 蛋白表达技术全攻略 一、大肠杆菌 表达载体 大肠杆菌表达载体都是质粒载体。作为表达载体首先必须满足克隆 载体的基本要求,即能将外源基因运载到大肠杆菌细胞中。在基本骨架的基础上增加表达元件,就构成了表达载体。各种表达载体的不同之处在于其表达元件的差异。 1.表达融合蛋白的表达载体 当蛋白质表达以后,有效的分离纯化或分泌就成为获得目标蛋白的关键因素。通过以融合蛋白的形式表达,并利用载体编码
【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择!(接原原核表达研究者关心的10个问题贴)
表达真核基因的时候,真核基因中的一些密码子对于原核细胞来说可能是稀有密码子,从而导致表达效率和表达水平很低。改造基因是比较麻烦的做法,Rosetta 2系列就是更好的选择——这种携带pRARE2质粒的BL21衍生菌,补充大肠杆菌缺乏的七种(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA 及CGG)稀有密码子对应的 tRNA,提高外源基因、尤其是真核基因在原核系统中的表达水平。(已经携带有氯霉素抗性质粒)。 当要表达的蛋白质需要形成二硫键以形成正确的折叠时,可以选择K–12衍生菌
,TaKaRa,有木有;pGM-T,天根,有木有;一些表达载体,使用最广泛的,pET 系列,Novagen 公司(默克)的;有双 MCS 的 Duet 系列载体,Novagen 的;毕赤酵母表达质粒 pPIC3.5k,pPIC9k,pPICZA,pPICZaA 等等,都是 invitrogen 的;另外一些 pYES 酿酒酵母表达系统,也是 invitrogen 的,因此知道常见的质粒是哪个公司的,去他们公司网站上肯定可以找到该质粒的相关信息。在他们公司主页搜索栏直接搜索质粒名称,得到质粒序列,图谱什么的











