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pET20b-α-Hemolysin-2×linker-mC

herry质粒
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  • YLKBIO
  • YLK-ZL0081
  • 国产
  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      pET20b-α-Hemolysin-2×linker-mCherry

    • 保质期

      90天

    • 供应商

      优利科(上海)生命科学有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      质粒干粉

    产品细节图片1

    产品名称:pET20b-α-Hemolysin-2×linker-mCherry质粒
    产品规格:质粒干粉
    有效期:90天,请尽快转化。
    保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
    运输方式:常温运输,1周内。
    应用领域:
    载体宿主:大肠杆菌,载体用途:蛋白表达,基因种属:病毒,基因类型:ORF,原核抗性:Amp,荧光蛋白:红色。
    生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5α)

    注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)
    产品细节图片2
    产品细节图片3

    1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
    2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀,冰上放置 30min;
    3.热激导入: 42℃静置 90s;
    4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
    5.修复培养: 毎管加 800μl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
    6.筛选培养: 将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
    7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。

    pET20b-α-Hemolysin-2×linker-mCherry质粒培养基:LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。


    产品细节图片4

     
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      有效; (2) 直接利用第一链反应产物,无须进一步处理和纯化; (3) 不必使用S1 核酸酶来切割双链cDNA 中的单链发夹环。目前合成cDNA 常采用该方法。 四、cDNA 的分子克隆   已经制备好的双链cDNA 和一般DNA 一样,可以插入到质粒或噬菌体中,为此,首先必需连接上接头(Linker),接头可以是限制性内切酶识别位点片段,也可以利用末端转移酶在载体和双链cDNA的末端接上一段寡聚dG 和dC 或dT 和dA 尾巴,退火后形成重组质粒,并转化到宿主菌中进行扩增。合成的cDNA

    • 【公告】核酸技术版零应助贴整理2007.6.1-2007.6.30,请大家积极参与讨论,加分从优!

      /view?bid=64&id=9269442&sty=1&tpg=25&age=0 45.pet28a的载体构建,经过pcr 鉴定是阳性,但摇菌后无质粒 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9258452&sty=1&tpg=25&age=0 46.提取微量样品基因组DNA http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9296277&sty=1&tpg=23&age=0 47.【求助】提质粒PEG

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