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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
pET20b-α-Hemolysin-2×linker-mCherry
- 保质期:
90天
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
质粒干粉
产品名称:pET20b-α-Hemolysin-2×linker-mCherry质粒
产品规格:质粒干粉
有效期:90天,请尽快转化。
保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
运输方式:常温运输,1周内。
应用领域:载体宿主:大肠杆菌,载体用途:蛋白表达,基因种属:病毒,基因类型:ORF,原核抗性:Amp,荧光蛋白:红色。
生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5α)
注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)


1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀,冰上放置 30min;
3.热激导入: 42℃静置 90s;
4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
5.修复培养: 毎管加 800μl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
6.筛选培养: 将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
pET20b-α-Hemolysin-2×linker-mCherry质粒培养基:LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。
| pET28a-EGFP大肠绿色荧光表达质粒 |
| L4440载体 |
| pLAMP1-mCherry质粒 |
| pGADT7-Rec质粒 |
| pREDKI质粒 |
| pTRE3G质粒 |
| pEnCMV-KRAS WT-3×FLAG质粒 |
| pCMV-HA-Ub质粒 |
| pMDLg-pRRE质粒 |
| pTRIP-SFFV-mtagBFP-2A STING质粒 |
| pgr107质粒 |
| pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK质粒 |
| PL6-CS-WR质粒 |
| pShuttle质粒 |
| pBiT1.1-N [TK-LgBiT]质粒 |
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文献和实验pET17b 大肠杆菌质粒 Amp pET19b 大肠杆菌质粒 Amp pET20b 大肠杆菌质粒 Amp pET21b 大肠杆菌质粒 Amp
有效; (2) 直接利用第一链反应产物,无须进一步处理和纯化; (3) 不必使用S1 核酸酶来切割双链cDNA 中的单链发夹环。目前合成cDNA 常采用该方法。 四、cDNA 的分子克隆 已经制备好的双链cDNA 和一般DNA 一样,可以插入到质粒或噬菌体中,为此,首先必需连接上接头(Linker),接头可以是限制性内切酶识别位点片段,也可以利用末端转移酶在载体和双链cDNA的末端接上一段寡聚dG 和dC 或dT 和dA 尾巴,退火后形成重组质粒,并转化到宿主菌中进行扩增。合成的cDNA
【公告】核酸技术版零应助贴整理2007.6.1-2007.6.30,请大家积极参与讨论,加分从优!
/view?bid=64&id=9269442&sty=1&tpg=25&age=0 45.pet28a的载体构建,经过pcr 鉴定是阳性,但摇菌后无质粒 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9258452&sty=1&tpg=25&age=0 46.提取微量样品基因组DNA http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9296277&sty=1&tpg=23&age=0 47.【求助】提质粒PEG










