- ￥1400
- YLKBIO
- YLK-XB2060
- 上海
- 2025年12月23日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
/
- 细胞类型：
细胞系
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
Opossum Kidney; OK-WT
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
永久
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
/
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 免疫类型：
/
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
/
- 组织来源：
/
- 规格：
1×10⁶cells/T25培养瓶
细胞中文名称：OK负鼠肾细胞（带鉴定）
| 名称 | OK (负鼠肾细胞) |
| 别称 | Opossum Kidney; OK-WT |
| 种属 | 负鼠 |
| 年龄（性别） | 雌性，成年 |
| 组织来源 | 正常；肾，皮质；近小管 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 背景描述 | OK细胞最初是为研究X染色体失活时提供X染色体；随后发现，OK细胞是极好的肾近曲小管上皮细胞的细胞培养模型。OK细胞在培养时表达多种受体，并被广泛地用作研究这些受体的模型。 |
| 生长培养基 | MEM＋10% FBS＋1% P/S |
| 推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2~3次/周 |
| 倍增时间 | ~18小时 |
| 冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃ |
| 受体表达情况 | alpha 2 adrenergic, expressed; atrial natriuretic peptide (ANP), expressed; serotonin, expressed parathyroid hormone (PTH), expressed alpha 2 adrenergic; serotonin; parathyroid hormone (PTH); atrial natriuretic peptide (ANP) |
| 保藏机构 | ATCC; CRL-1840 ECACC; 91021202 |
1、 细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃， 5%CO2 细胞
培养箱中培养；
2、 细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）用适量的冻存液（FBS： DMSO=9 ： 1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结
晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2 培养瓶，于 37℃， 5%CO2 细胞培养箱中培养
OK负鼠肾细胞（带鉴定）收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，悬浮细胞需离心处理，加入6ml新鲜完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验GNHu20 人 恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞, 1000元 NK-92MI GNHu22 人 恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞, 1000元NRK GNR 2 大鼠 肾细胞 400元 OK GNO20 负鼠 负鼠肾细胞 1000元 OS-RC-2 TCHu 40 人 肾癌细胞 450元 P19 TCM27 小鼠 睾丸畸胎瘤细胞 1000元 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] TCM25 小鼠 骨髓瘤细胞 400元 P
向大家请教过，有战友反应这一步其实很简单，没什么很难得因素。但是不管怎样，我现在对长片段的TA克隆是有心理阴影了，所以我一般都是直接设计带酶切位点的PCR引物，扩增出目的片段后直接酶切再连目的载体，至今还没有做不出来的。 再次祝你好运，有进展记得与大家分享。 dolphin_705_200 4KB的PCR产物片段直接双酶切克隆，要靠运气了。强烈建议TA克隆，测序OK后，再换载体，这样的话成功率才会高。 楼主需要确认几点： 1，PCR
。那么，如何对这个问题进行研究呢？这里狗哥就带大家简单梳理一下常用的蛋白质相互作用的研究方法。图 1酵母双杂交，Yeasttwo hybrid（Y2H）, 这是一个古老的技术，Stanley Fields 和 Ok-KyuSong 在 1989 年的时候利用大肠杆菌中 GAL4 乳糖操纵子的原理，开发出这个方法用于检测蛋白质之间的相互作用 。GAL4 操纵子有两个结构域，BD（binding domain）结构域和 AD（activation domain），其中 BD 结构域可以结合在 UAS
