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- YLK-XB1787
- 上海
- 2025年12月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
/
- 细胞类型：
细胞系
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
H358; H-358; NCIH358
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
永久
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
永久
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 免疫类型：
/
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
/
- 组织来源：
/
- 规格：
1×10⁶cells/T25培养瓶
细胞英文名称：H358; H-358; NCIH358
细胞中文名称：NCI-H358人非小细胞肺癌细胞(带STR鉴定)
| 名称 | NCI-H358 (人非小细胞肺癌细胞) (STR鉴定正确) |
| 别称 | H358; H-358; NCIH358 |
| 种属 | 人类 |
| 年龄（性别） | 男性 |
| 组织来源 | 细支气管及肺泡癌；非小细胞肺癌；肺；细支气管；肺泡 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 背景描述 | NCI-H358细胞是于1981年从一位开始化疗之前的患者的肿瘤组织中分离得到的。超微结构研究表明，NCI-H358细胞的细胞质中有Clara细胞的特征结构，NCI-H358细胞表达主要的肺表面结合蛋白SP-A和RNA，不表达SP-B和SP-C；NCI-H358细胞在软琼脂中的克隆形成效率为0.83%。 |
| 生长培养基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
| 推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2~3次/周 |
| 倍增时间 | ~38-60小时 |
| 冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃ |
| 致瘤性 | Yes, the cells produce tumors in athymic nude mice. |
| 基因表达情况 | lung surfactant associated protein A (SP-A), The cells expressed protein and RNA of SP-A, the major lung surfactant associated protein. |
| 保藏机构 | ATCC; CRL-5807 ECACC; 95111733 |
STR位点信息
| Amelogenin | X,Y | D21S11 | 28,30 |
| CSF1PO | 11,12 | FGA | 20,21 |
| D2S1338 | 17,23 | PentaD | 10,13 |
| D3S1358 | 14,18 | PentaE | 18 |
| D5S818 | 10,12 | TH01 | 6 |
| D7S820 | 10,11 | TPOX | 8,9 |
| D8S1179 | 13,14 | vWA | 17 |
| D13S317 | 8,12 | D1S1656 | 15,15.3 |
| D16S539 | 12,13 | D6S1043 | 14 |
| D18S51 | 14 | D12S391 | 20 |
| D19S433 | 13,14 |
1、 细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃， 5%CO2 细胞
培养箱中培养；
2、 细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）用适量的冻存液（FBS： DMSO=9 ： 1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结
晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2 培养瓶，于 37℃， 5%CO2 细胞培养箱中培养
NCI-H358人非小细胞肺癌细胞(带STR鉴定)收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，悬浮细胞需离心处理，加入6ml新鲜完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……，这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
都是贴壁细胞，在消化传代过程中，步骤如下：倒尽旧的培养液－＞用无血清的培养基清洗一两次－＞加入一定量的胰酶，置于37度培养箱中5--10分钟，使细胞悬浮－＞显微镜下观察，待细胞大部分变圆时，回到超静台－＞加入一定量的含血清的新培养液，以终止胰酶作用－＞反复吹打细胞－＞再置显微镜下观察，直到细胞全部悬浮起来－＞吸出一部分加入新的培养瓶中－＞最后再补充加入一定量新的培养液。注意： 1、吹细胞时尽量多吹边角儿，此处细胞生长的多。2、吸出细胞前要混匀，可以剧烈震荡培养瓶。3、我们用的是DMEM
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