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文献和实验分离液中的分离效果 淋巴细胞分离液液面上 4、用巴士滴管或移液器收集界面上的白细胞层,放入灭菌的1.5 mL EP离心管中,以 10,000 转/分,离心5 分钟,吸掉上清。可见白色的沉淀,有时白色的沉淀上还混有红色的血细胞(少量红细胞无妨),见图5。 图5 分离的白细胞再次离心后形成的沉淀 5、吸去
人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
请参阅分析证书。 6. 将细胞以200 x g离心2分钟。去除并倒掉上清液。 7. 添加适量的培养基(例如,6孔板每孔1.5 - 2 mL)以准备培养容器。 8. 轻拍15 mL离心管,以使细胞沉淀脱离,然后轻轻加入1 mL适当的培养基,并接种到包被的6孔板的2个孔中(如果使用其他培养形式,或者如果分析证书另有说明,则相应加以调整)。请勿过度吸取细胞,否则会因为单细胞悬液的生成而造成细胞活力下降。 9. 轻轻左右和前后摇动板,以使细胞均匀铺展在整个孔中。 10. 建议在解冻后立即、48小时、以及约
(依此类推)。 15、将收集的类器官转移到 5 ml Eppendorf 管中并放在冰上,4℃ 条件下 220g 离心 5min。 16、去除离心上清,并添加 37℃ 预热的 TrypLE Express(含 10μM Y27632)。轻轻旋转 Eppendorf 管,使类器官与 TrypLEExpress 混合均匀。 17、37℃ 条件下将类器官与 TrypLE 孵育 10min(致密型类器官)或 5min(低粘性和囊性类器官)。 18、加入 500μl 预冷的 DMEM/F12 终止消化,4℃
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