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文献和实验液氮是一种特殊的工业制成品,在畜牧品种改良工作中,液氮是精液及胚胎的主要冷冻贮存媒介。但笔者在实际生产中,发现由于对液氮及液氮生物容器特性的不了解,而造成的不合理使用现象严重,既易造成液氮的浪费,增加生产成本,严重的还可能发生伤人事故。下面,笔者就液氮使用过程中几个常见问题介绍如下:一、液氮的来源 液氮来源于空气。空气中所含主要气体成分分为氧气和氮气,其中,氮气约占空气的78.09%,液氮即为液化的氮气。二、液氮的特性 液氮由于是由氮气压缩冷却下来,其理化性质比较特殊。主要特性
一、新购置的液氮容器以及使用一段时间又在使用的容器,必须先做液氮性能检查。二、液氮容器在使用和运输过程汇总,都应垂直停放,严禁横卧、碰撞记载瓶盖是那个放置任何东西,在运输过程中应注意防震,最好放置木箱内。固定在汽车上,严禁放在汽车顶棚上。三、液氮容器在使用过程中,每天都应随时检查容器的使用情况,如发现容器瓶盖上和上部有水珠或结霜情况,说明容器质量出现问题,应立即停止使用。四、液氮容器应放在阴凉干燥处,应有良好的通风,不应放置在靠近热源,阳光直找,以及风口处,严禁放置液氮容器的房间紧闭
。(此步骤一定要吸干水分,如有液体残留,OCT包埋后,组织表面形成冰晶,影响切片效果)。整个样本处理过程需要保持低温环境。 组织冰冻 在金属烧杯中加入三分之二的异戊烷(使样本足以完全浸入液体中), 然后放入液氮容器(与异戊烷的液面相平)中,使其充分接触,孵育15分钟。同时将所有过程中的采集器具进行预冷。 用预冷的样本匙将新鲜组织浸没在异戊烷中,速冻约1min或直至组织完全冷冻。 采用异戊烷而不是液氮的原因是液氮的沸点低,组织直接放入液氮后会沸腾,在组织周围产生气穴,导致组织降温过程
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