- ￥10280
- 近岸蛋白(Novoprotein)
- E365-01B
- 中国
- 2025年10月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
NLS-Cas9 Nuclease
- 规格：
500ug
目录号：E365-01B
产品描述:
CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9系统通过将入侵噬菌体和质粒 DNA的片段整合到CRISPR序列中，并利用相应的CRISPR RNAs （crRNAs）来指导Cas9蛋白对同源序列的降解，从而提供免疫性。 人工改造过的Cas9/sgRNA系统通过sgRNA（short guide RNA）引导 Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA，可用于基因敲除和精确编辑DNA等操作。本试剂盒提供的Cas9核酸内切酶通过在蛋白两端加了核定位信号（NLS），可使蛋白进入细胞核内进行基因组编辑。
产品特点：
纯蛋白体系，避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰。
产品用途：
基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除；
基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入；
sgRNA剪切靶点DNA效率检测，降低体内筛选成本；
体外剪切靶DNA的特异位点。
保存温度：
-20℃保存。
应用实例：
图例）Cas9 Nuclease 做DNA 片段切割活性检测。
带有靶位点的DNA片段为6100bp；
酶切后的片段为3900bp和2200bp。
参考文献：
Targeting herpes simplex virus with CRISPR-Cas9 cures herpetic stromal keratitis in mice[J]. Di Yin. et al. nature biotechnology. 2021.
Chromatin architecture reveals cell type-specific target genes for kidney disease risk variants[J]. Aiping Duan. et al. BMC Biology. 2021.
Extracellular vesicles engineered with valency-controlled DNA nanostructures deliver CRISPR/Cas9 system for gene therapy[J]. Jialang Zhuang. et al. Nucleic Acids Research. 2020.
Different lineage contexts direct common pro-neural factors to specify distinct retinal cell subtypes[J]. Mei Wang. et al. Journal of Cell Biology. 2020.
Structural insights into DNA cleavage activation of CRISPR-Cas9 system[J]. Cong Huai et al. Nature Communications. 2017.
Optimizing sgRNA structure to improve CRISPR-Cas9 knockout efficiency[J]. Ying Dang et al. Genome Biology. 2015.
High-Effective and Low-Cost microRNA Detection with CRISPR-Cas9[J]. Xin-yuan Qiu et al. ACS Synthetic Biology. 2018.
Efficient genome editing in filamentous fungi via an improved CRISPR‐Cas9 ribonucleoprotein method facilitated by chemical reagents[J]. Gen Zou. et al. microbial biotechnology. 2020.
CRISPR/Cas9-mediated somatic and germline gene correction to restore hemostasis in hemophilia B mice[J]. Cong Huai et al. Human Genetics. 2017.
Pyroptosis Mediates Neutrophil Extracellular Trap Formation during Bacterial Infection in Zebrafish[J]. Weijie Chen. et al. The Journal of Immunology. 2021.
For research use only.
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文献和实验CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理
functions [ 16 – 18 ]. These studies demonstrated that Cas9 is a RNA-guided nuclease that is capable of binding to a targetDNA and introduce a double strand break in a sequencespecific manner, and its specifi city is determined by sequenceencoded
40 个），在 Cas9 切开双链之后，模板的两臂同源序列直接互补（HDR，同源修复），从而完成了基因编辑。聪不聪明！上传一张自己的理解图4. Clonal isolation of cell lines 将已编辑的细胞分离开来这个很好理解，在编辑片段中加入抗生素抗性基因或者荧光基因后，可通过抗生素筛选或者 FACS 分离。5. Functional testing 功能验证（1）SURVEYOR nuclease assay（2）Detection of indels or HDR
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