目录号:GMP-E127-01A
产品描述:
在mRNA大规模生产过程中,转录结束后需要对转录模板进行去除,DNase I 可以将单链或者双链 DNA 进行同等程度的随机分解,生成具有 5'-P 末端寡核苷酸。在Mg2+条件下,DNase I可以对双链DNA进行随意剪切。
DNase I(Deoxyribonuclease I,脱氧核糖核酸酶 I)最初分离自牛胰脏,分子量约为 39 kD,是一种脱氧核糖核酸内切酶,可将单链或双链 DNA 同等程度进行随机分解,生成具有 5'-P 末端寡核苷酸。DNase I 水解单链或双链 DNA,其活性非常依赖于 Ca2+水平,并能被 Mg2+或 Mn2+激活。
本制品为利用毕赤酵母大规模发酵表达的 GMP 级重组 DNase I,采用药用规格原辅料生产,并严格控制宿主蛋白质残留、核酸残留等,符合 GMP 规范的产品生产与质量管理规程保障生产过程及所有原辅料可追溯。
质量要求:
遵循以下规范生产:
1.ISO 9001:2015, certified facility。
2.《GMP 附录-细胞治疗产品》国家药品监督管理局。
3.《人用基因治疗总论-中国药典 2020》国家药典委。
4.USP Chapter <1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products 用于细胞治疗,基因治疗和组织工程产品中的辅料。
5.USP Chapter <92>, Growth Factors and Cytokines Used in Cell Therapy Manufacturing 细胞治疗产品生产过程中细胞因子和生长因子。
6.Ph. Eur. General Chapter 5.2.12, Raw Materials of Biological Origin for the Production of Cell-based and Gene Therapy Medicinal Products 用于生产细胞或基因治疗药物的生物来源原料。
产品用途:
1.制备不含 DNA 的 RNA 样品。
2.RT-PCR 反应前 RNA 样品中,去除基因组 DNA 等可能的 DNA 污染。
3.体外 T7,T3,SP6 等 RNA 聚合酶催化的体外转录后去除 DNA 模板。
4.用于足迹法(Footprinting)分析 DNA-蛋白质相互作用。
5.与 DNA Polymerase I 一起用于切口平移。
6.二价锰离子存在条件下,使 DNA 片段化,产生 DNA 随机片段文库。
7.细胞凋亡 TUNEL 检测中部分剪切基因组 DNA 作为阳性对照。
活性定义:
37℃ 10 分钟内,将能够完全降解 1μg pBR322 质粒 DNA 所需的酶量定义为 1 个活性单位。
保存体系:
10 mM Tris-HCl (pH7.6); 2 mM CaCl2; 50% (v/v) Glycerol。
保存温度:
-20±5 ℃。
注意事项:
1.最适 pH:7.0-8.0。
2.活化剂:DNase I 需要二价阳离子以达到最大活性。
3.抑制剂:EDTA, EGTA, SDS。
4.特异性:降解 DNA 的双链特异性的核酸内切酶。
5.使用时将酶置于冰上操作,使用完毕后-20℃保存。
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For research and manufacturing use only.