DNase I, GMP Grade

目录号：GMP-E127-01A

 

产品描述： 

在mRNA大规模生产过程中，转录结束后需要对转录模板进行去除，DNase I 可以将单链或者双链 DNA 进行同等程度的随机分解，生成具有 5'-P 末端寡核苷酸。在Mg²⁺条件下，DNase I可以对双链DNA进行随意剪切。

DNase I（Deoxyribonuclease I，脱氧核糖核酸酶 I）最初分离自牛胰脏，分子量约为 39 kD，是一种脱氧核糖核酸内切酶，可将单链或双链 DNA 同等程度进行随机分解，生成具有 5'-P 末端寡核苷酸。DNase I 水解单链或双链 DNA，其活性非常依赖于 Ca²⁺水平，并能被 Mg²⁺或 Mn²⁺激活。

本制品为利用毕赤酵母大规模发酵表达的 GMP 级重组 DNase I，采用药用规格原辅料生产，并严格控制宿主蛋白质残留、核酸残留等，符合 GMP 规范的产品生产与质量管理规程保障生产过程及所有原辅料可追溯。 

 

质量要求：

 

遵循以下规范生产：

1.ISO 9001:2015, certified facility。

2.《GMP 附录-细胞治疗产品》国家药品监督管理局。

3.《人用基因治疗总论-中国药典 2020》国家药典委。

4.USP Chapter <1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products 用于细胞治疗，基因治疗和组织工程产品中的辅料。

5.USP Chapter <92>, Growth Factors and Cytokines Used in Cell Therapy Manufacturing 细胞治疗产品生产过程中细胞因子和生长因子。

6.Ph. Eur. General Chapter 5.2.12, Raw Materials of Biological Origin for the Production of Cell-based and Gene Therapy Medicinal Products 用于生产细胞或基因治疗药物的生物来源原料。

 

  产品用途：

1.制备不含 DNA 的 RNA 样品。

2.RT-PCR 反应前 RNA 样品中，去除基因组 DNA 等可能的 DNA 污染。

3.体外 T7，T3，SP6 等 RNA 聚合酶催化的体外转录后去除 DNA 模板。

4.用于足迹法（Footprinting）分析 DNA-蛋白质相互作用。

5.与 DNA Polymerase I 一起用于切口平移。

6.二价锰离子存在条件下，使 DNA 片段化，产生 DNA 随机片段文库。

7.细胞凋亡 TUNEL 检测中部分剪切基因组 DNA 作为阳性对照。

 

活性定义：

37℃ 10 分钟内，将能够完全降解 1μg pBR322 质粒 DNA 所需的酶量定义为 1 个活性单位。 

 

保存体系：

10 mM Tris-HCl (pH7.6); 2 mM CaCl2; 50% (v/v) Glycerol。 

 

保存温度：

-20±5 ℃。

 

注意事项：   

1.最适 pH：7.0-8.0。

2.活化剂：DNase I 需要二价阳离子以达到最大活性。

3.抑制剂：EDTA, EGTA, SDS。

4.特异性：降解 DNA 的双链特异性的核酸内切酶。

5.使用时将酶置于冰上操作，使用完毕后-20℃保存。

 

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For research and manufacturing use only.