EF1-Blasticidin-U6-gRNA linear

增进RNAi分析的强大工具

用293FT细胞系和相关的ViraPower™ 试剂制备的高滴度的慢病毒储备液，进行有效的和可控制的导入。一旦制备好了慢病毒储备液，就可以转染细胞以观测RNAi反应（图9）。pLenti6/BLOCK-iT™-DEST 慢病毒 RNAi 载体（ pLenti6/BLOCK-iT™-DEST Lentiviral RNAi vector）提供能够长期观察稳定RNAi效应的能力。这个载体包含包装U6RNAi框到病毒所需的全部的元件，因而你能够转染shRNA到正在分裂、难于转染和不分裂的细胞中（图10

Genotyping Transgenic Rodents by PCR

with an extra 10% to account for pipetting errors. Remember to include a negative control of water only and a positive control of known transgenic mouse DNA or linearized plasmid DNA diluted in mouse tail DNA to the one copy level. Remember to include

核糖核酸酶保护实验相较于Northern的优势与问题分析

研究速度   这个方法的的主要缺点如下： 1.  这个实验的前提是你必须首先要把要研究的基因克隆于一个载体，要清楚插入片段的方向，该载体插入片段两侧有T3、T7或SP6的启动子位点。载体先要用合适的内切酶线性化，选择正确的体外转录试剂盒，转录出要研究的mRNA 的互补链，再纯化。总之RNA探针的制备够麻烦。 2.  核酸酶消化时，酶量的控制困难，容易消化过头，X片上什么都没有。 3.  要用放射性同位素。从事生物研究的人谁不接触放射性物质?但是该方法中不同