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文献和实验:96孔光学反应板配合光学膜,0.2 ml光学八联反应管配合光学膜,0.2 ml光学八联反应管配合平盖的光学八联管盖。ABI公司生产的定量PCR耗材的具体使用方法和货号见下表:3. 为什么要定期对电脑进行磁盘碎片整理?怎样整理? 当运行实时定量PCR仪及使用软件分析实验结果时,计算机会删除并创建若干文件,计算机硬盘的空闲空间会被分割成越来越多的小块。当硬盘驱动器上文件以分解的碎片存储时,程序需要更长的时间才能存取文件,因为必须多次寻找文件碎片以存取不同的片断。碎片整理实用程序将一个文件分解开的多个
。 SYBR Green Mix、配置的混合体系需要混合均匀。从 -20℃ 冰箱拿出的试剂需要完全融化并上下颠倒彻底混匀;配置体系时,将混在一起的 Mix 用移液器吹打混匀。 ②移液器吸取液体的准确度 移液器量程定期校准,校准周期为 1 年。 购买与移液器配套的枪头,若枪头与移液器不匹配,在吸取液体时易出现漏气的现象,导致吸取量程不准确。 在吸取相同量程的液体体积时,注意观察每次吸取液体在枪头内的液面高度是否一致。 ③定期校准 qPCR 仪 一般 qPCR 仪校准周期为一年
、外泌体 miRNA qPCR 实验选用哪个基因做内参? 答:外泌体 qPCR 目前没有公认内参基因,本公司检测 miRNA 做的是外参。外参可以最大限度降低对定量实验造成的干扰,适用于内参表达不稳定的外泌体或暂未发现合适内参的其他样品,对目的 microRNA 进行相对定量,替代内参作用。部分文献也会选取U6等作为内参。 16、下游 qPCR 检测时 CT 值过高如何处理? 答:外泌体 RNA 是微量的存在,首先样品准备阶段确保样品的质量和数量充足(例如血清建议新鲜样本准备 2ml 以上)。有实验
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