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BestBio-贝博BCA 蛋白定量试剂盒

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  • 中国 BestBio-贝博
  • 2025年07月16日
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    • 保质期

      一年

    • 保存条件

      BCA试剂室温保存。蛋白标准-20°C保存。

    • 库存

      大量

    • 供应商

      Bestbio-贝博

    • 规格

      250 assays/1000 assays

    产品简介:
    碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。
    BCA 法快速灵敏、稳定可靠,对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小。BCA 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞蛋白提取过程中,常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可用BestBio贝博Bradford蛋白浓度测定试剂盒
    产品组成:

    产品组成
    301001(250 assays)
    301002(1000 assays)
    蛋白标准(1mg/ml)
    0.5ml
    2ml
    BCA试剂A
    50ml
    200ml
    BCA试剂B
    1ml
    4ml

    使用方法:
    A.96孔酶标板测定:
    1. BCA工作液配制。根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。
    2. 标准曲线绘制。取一块酶标板,按以下表格数据加入试剂:

    孔号
    0
    1
    2
    3
    4
    5
    6
    7
    蛋白标准(ml
    0
    1
    2
    4
    8
    12
    16
    20
    去离子水(ml
    20
    19
    18
    16
    12
    8
    4
    0
    BCA工作液ml
    200
    200
    200
    200
    200
    200
    200
    200
    对应的蛋白含量(mg
    0
    1
    2
    4
    8
    12
    16
    20

    3. 振荡混匀后,37℃放置30分钟。
    4. 用酶标仪测定A562,以不含BSA的光吸收值为空白对照
    5. 以蛋白含量(mg)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线
    6. 样品测定:将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度,取20ml样品,加入200ml BCA工作,混匀后37℃放置30分钟,然后以0号孔为对照,测定样品吸收值A562。
    7. 根据测得的吸收值,在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量
    8. 计算蛋白浓度:以查得的蛋白含量除以样品体积20ml,再乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度
    B.比色皿测定
    按照比色皿规格,与以上方法相同,适当按比例增加各溶液体积即可。
    储存条件:
    BCA试剂室温保存。蛋白标准-20°C保存。 有效期:一年。

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