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- 2025年06月29日
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大量
- 英文名：
Recombinant Human GM-CSF
- 规格：
2ug
Source: Escherichia coli.
Molecular Weight: Approximately 14 kDa, a single non-glycosylated polypeptide chain containing 127 amino acids.
Quantity: 2ug/10ug
Purity: >96% by SDS-PAGE and HPLC analyses.
Biological Activity:
Fully biologically active when compared to standard. The ED50 as calculated by the dose-dependant stimulation of the proliferation of human TF-1 cells is less then 0.1 ng/ml. corresponding to a Specific Activity of 1 x 107 IU/mg.
Physical Appearance: Sterile Filtered White lyophilized (freeze-dried) powder.
Formulation: Lyophilized from a 0.2μm filtered concentrated (1mg/ml) solution in PBS, pH 7.4.
Endotoxin: Less than 1EU/μg of rHuGM-CSF as determined by LAL method.
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文献和实验体易于与细胞其他组分分离，但需要注意的是蛋白复性的步骤。一般采用盐酸胍溶解包含体蛋白后，用稀释的办法进行复性，也可以利用凝胶过滤色谱进行复性（已有多种凝胶可以促进蛋白质的复性的报道）。以下以rhGM-CSF（重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子）的下游纯化工艺为例： E.coli细胞，超声破碎，离心收集包含体，用7mol/L盐酸胍溶解包含体蛋白，作1：70稀释使蛋白复性，加硫酸铵至一定浓度后，上样于Phenyl-Sepharose 6 FF（high sub）色谱柱，活性组分再上Q
。 材料和方法 主要试剂和仪器 IMDM完全培养基为Gibco公司产品，10%AB灭活血清为南京红十字血液中心产品，AIM-V无血清培养基为Gibco公司产品，淋巴细胞分离液购自上海第二制药厂，CD3单克隆抗体购自Ortho Biotech公司，IFN-α1b购自上海生物制品研究所，rhIL-2购自Chiron公司，rhGM-CSF，rhIL-1β，rhIL
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