- ￥1095
- YLKBIO
- YLK-KT0873
- 国产
- 2025年06月30日
- WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000
- 兔
- Human, Mouse, (predicted: Rat, Dog, Pig, Cow, Guinea Pig, )
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
55
- 靶点：
/
- 级别：
科研
- 目录编号：
KT0873
- 克隆性：
多克隆
- 抗原来源：
/
- 保质期：
1年
- 抗体英文名：
Annexin V
- 抗体名：
Rabbit Anti-Annexin V antibody
- 标记物：
详询
- 宿主：
兔
- 适应物种：
Human, Mouse, (predicted: Rat, Dog, Pig, Cow, Guinea Pig, )
- 免疫原：
KLH conjugated synthetic peptide derived from human Annexin V: 271-320/320
- 亚型：
IgG
- 形态：
Liquid
- 应用范围：
WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000
- 保存条件：
-20℃
- 浓度：
1mg/ml
- 规格：
50ul
中文名称：膜粘连蛋白5抗体
英文名称：Annexin V
别 名：Anchorin CI; Annexin 5; Annexin A5; Annexin V; Annexin5; AnnexinA5; AnnexinV; ANX 5; ANX A5; ANX5; ANXA5; Calphobindin I; CBP I; CBP-I; Endonexin II; ENX 2; ENX2; Lipocortin V; PAP I; Placental anticoagulant protein I; PAP-I; Placental anticoagulant protein 4; PP 4; PP4; Thromboplastin inhibitor; VAC alpha; Vascular anticoagulant alpha; Vascular anticoagulant-alpha; ANXA5_HUMAN; Anchorin CII; Annexin-5; VAC-alpha.
货号：YLK-KT0873
分 子 量：36kDa
细胞定位：细胞浆 细胞膜
纯化方法：affinity purified by Protein A
储 存 液：0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
膜粘连蛋白-5是一种分子量为35～36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力特异性结合。
将膜粘连蛋白5进行荧光素（FITC、PE）或biotin标记，以标记了的Annexin-V作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。
其意义：检测早期凋亡的细胞，同时可区分活细胞和坏死细胞
磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine，PS）正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。
碘化丙啶（propidine iodide，PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此将Annexin-V与PI匹配使用，就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。
将Annexin-V进行荧光素标记，检测早期凋亡的细胞
方法：
1 悬浮细胞的染色：将正常培养和诱导凋亡的悬浮细胞（0.5～1×106）用PBS洗2次，加入100ul Binding Buffer和FITC标记的Annexin-V（20ug/ml）10ul，室温避光30min，再加入PI（50ug/ml）5ul，避光反应5min后，加入400ul Binding Buffer，立即用FACScan进行流式细胞术定量检测（一般不超过1h）， 同时以不加AnnexinV-FITC及PI的一管作为阴性对照。
2 贴壁培养的细胞染色：先用0.25%的胰酶消化，洗涤、染色和分析同悬浮细胞。
3 爬片细胞染色：同上，最后用荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜进行观察。
注意事项：
1 整个操作动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞。
2 操作时注意避光，反应完毕后尽快在一小时内检测。
注意：
所提供的本产品仅供研究使用，不得用于人类、治疗或诊断应用。
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文献和实验培养板应当与购买的 Transwell 小室相配套。07 相关信息此外，膜的下室面可涂上纤维粘连蛋白（fibronectin，FN，Sigma有售)，这样做的目的是使穿过膜的细胞更好地附着在膜上，也可用胶原（collagen）或明胶（gelatin）。很多人认为这不是必须的，而且我也是不涂的，细胞照样贴壁很好。如果贴壁不好的话可以试试看。也有人认为，如果培养时间很长（>24 h），细胞还是会掉到下室里面去，所以有条件的话，最好还是在膜下层涂上 FN。另外，膜下层涂上 FN 还有一定的趋化作用。实验
免疫印迹(Western blot)简介和原理 免疫印迹用于鉴定能够与特异性抗体相互作用的大分子抗原（一般为蛋白质）并测定抗原的大小。蛋白质首先通过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，再通过电泳转移到固相支持物上，固相支持物包括硝酸纤维素膜，聚偏乙烯二氟（PVDF）膜和阳离子尼龙膜等。首先把膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附，这样固定的蛋白即可与特异性的多克隆或单克隆抗体相互作用。最后通过放射，生色或化学发光的方法进行定位。 实验常规试剂 1.0 mol/L Tris•HCl
① 膜封闭时间不够，室温下通常摇床孵育膜 1h，出现这种情况可以更换合适的封闭液或者适当延长封闭的时间； ② 抗原抗体免疫过程中一抗稀释度太高，可以多设置几组一抗浓度，摸索最适宜的抗体稀释度； ③ 在整个实验过程中膜发生干燥或手套反复接触过也会发生背景值高的情况，因此实验过程中要注意保持膜的湿润，使用镊子夹取膜。 3、WB 结果中有杂带干扰 ① 抗体纯度不高会产生非特异性条带影响结果，高纯度抗体条带特异性更好，建议更换抗体； ② 一抗浓度过高，降低一抗稀释比，目的条带和杂带可能会减弱
