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2年
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上海西宝
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1
- 英文名:
Dextran sulphate sodium
- 规格:
100g
小鼠给予含50g/L硫酸葡聚糖(葡聚糖硫酸钠)5000或40000的蒸馏水自由饮用7d,出现体重减轻、腹泻、血便等急 性肠炎的表现.病理学切片HE染色发现小鼠病变结肠腺体结构紊乱,黏膜和黏膜下单核细胞和多核细胞浸润.DSS组病变肠段组织GSH表达较对照组明显减少 (2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95, P = 0.01<0.05),病变结肠分泌的IL-4明显升高(38.7±4.7 vs 28.7±6.7,t = 3.16, P = 0.009<0.01),IFN-g轻度降低(P>0.05).
资料来源:《GSH在DSS诱导的小鼠实验性肠炎中的作用》
将分子量为50 00或40000的DSS溶于饮用水,配成3% DSS溶液,让BALB/C小鼠自由饮用7d,建立小鼠急性结肠炎模型;②让BALB/C小鼠自由饮用3% DSS溶液7d,然后饮用不含DSS蒸馏水14d,建立小鼠慢性结肠炎模型;模型建立成功的标志为饮用3% DSS 7 d后出现半稀便、腹泻、大便隐血(+)和肉眼血便中的任一症状。
资料来源:《葡聚糖硫酸钠致小鼠结肠炎模型的建立与评价》。
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文献和实验结合亚硫酸氢钠处理和酶解分析(COBRA) 亚硫酸氢钠处理的DNA 扩增后使甲基化的胞嘧啶残基成为胸腺嘧啶,而已经甲基化的胞嘧啶残基仍维持胞嘧啶。这种变化会产生新的酶切位点或保持原有的甲基化依赖位点。PCR反应的引物中不包含CpG二核苷酸,因此与模板和原来的甲基化位点不会混淆。在此之后,将PCR产物纯化、酶切、聚丙烯酰胺凝胶电泳、电印迹、单核苷酸杂交和磷图像定量。 COBRA是一个测定DNA甲基化敏感的定量方法,在检测完全甲基化和完全
亚硫酸氢钠测序法(bisulfite genomic sequencing)
亚硫酸氢钠测序法(bisulfite genomic sequencing)直接测序法是建立在MSP基础上进一步深入研究CpG岛各个位点甲基化情况的方法。重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变,行PCR扩增(引物设计时尽量避免有CpG,以免受甲基化因素的影响)所需片段,则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶。最后,对PCR产物进行测序,并且与未经处理的序列比较,判断是否CpG位点发生甲基化。此方法一种可靠性及精确度很高的方法,能明确目的片段中每一个CpG
亚硫酸氢钠测序法(bisulfite genomic sequencing)原理
直接测序法是建立在MSP基础上进一步深入研究CpG岛各个位点甲基化情况的方法。重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变,行PCR扩增(引物设计时尽量避免有CpG,以免受甲基化因素的影响)所需片段,则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶。最后,对PCR产物进行测序,并且与未经处理的序列比较,判断是否CpG位点发生甲基化。此方法一种可靠性及精确度很高的方法,能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态。在寻找有意义的关键性CpG位点上,有其他方法无法
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