犬瘟热的诊断
根据流行病学资料和临床症状,可以做出初步诊断。确诊须通过病原学与血清学检查。在宠物临床中普遍采用快速诊断试剂盒/检测卡。
1.病原学检查
有病毒分离、电镜观察、荧光抗体染色等方法。
CDV培养比较困难。动物试验以雪貂最为敏感,幼犬和鸡胚较为困难。细胞培养以犬肺巨噬细胞最易成功,一旦适应某种细胞后,即可在犬、猴、鸡、人等多种原代和传代细胞上生长。
为检查细胞培养物或外周血白细胞与肝、脾、肺等病料中的CDV,国内外已建立荧光抗体染色检查法,在被检标本的细胞浆内发现特异的荧光斑,即可确诊。
用上述标本的冻融液,进行直接负染或加CD特异血清的免疫电镜观察,可迅速做出诊断。
2.血清学检查
(1)中和试验
用标准的CDV与等量的被检血清,于室温感作1h后,接种6~8日龄鸡胚的绒毛尿囊膜,于35~37℃温箱中孵育6~7d,通过绒毛尿囊膜上的小"痘斑"出现情况,按统计学的方法,计算该血清的中和指数。
也可用敏感细胞,以细胞病变为指标进行微量细胞中和试验。
由于试验条件,尤其是所用病毒剂量的差别,所测出的血清中和效价也不完全一致,为此一定要用已知效价的标准血清做参照。
(2)补体结合试验
多以CDV的Vera细胞或鸡胚成纤维细胞培养物为抗原,检测被检血清中的补体结合抗体。由于该抗体出现较晚,感染后2~3周才出现,维持的时间也较短,所以只能作为一种证明近期感染的方法。
(3)间接酶标或荧光抗体法
应用间接酶标或间接荧光抗体法检查血清中的CDV特异IgM抗体,有可能用于本病的早期诊断。
试验发现,人工感染的CD病犬,7d后即开始出现IgM特异抗体,14d后达到最高,此后逐渐下降,至28d基本消失,而疫苗接种与回忆反应仅出现IgG,故检出CDV特异性IgM抗体,即可做出CDV感染的诊断。
(4)包涵体检查
在CD诊断中有一定的意义。CDV感染犬常可在其眼结膜、膀胱、肾盂、支气管上皮等细胞的胞浆或胞核内检出包涵体。
但由于与狂犬、犬传染性肝炎病毒等所形成的包涵体以及细胞本身某些反应产物难以区分,所以在判定时,应全面综合考虑。
(5)分子生物学诊断技术
国内外均已将RT-PCR和核酸探针技术用于本病诊断。该法简便快速,灵敏特异,有广阔应用前景。
来源:犬瘟热 (cloudvet.org)