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北京索莱宝科技有限公司
500Rxns
组分 | 500T | Storage |
快速内切酶XhoI | 500μl | -20℃ |
10× Reaction Buffer | 1 ml×2 | -20℃ |
10× Reaction Color Buffer | 1 ml×2 | -20℃ |
质粒 DNA | PCR 产物 | 基因组 DNA | |
ddH2O | 15μl | 16μl | 30μl |
10×Reaction Buffer 或10×Reaction Color Buffer | 2μl | 3 μl | 5μl |
底物 DNA | 2 μl (up to 1 μg) | 10 μl (~0.2 μg) | 10 μl (5 μg) |
快速内切酶 XhoI | 1μl | 1μl | 5μl |
Total | 20μl | 30μl | 50μl |
3. 适用于质粒的扩大反应体系 | |||||
DNA | 1 μg | 2 μg | 3 μg | 4 μg | 5 μg |
快速内切酶 XhoI | 1μl | 2μl | 3μl | 4μl | 5μl |
10× Reaction Buffer 或 10× Reaction Color Buffer | 2μl | 2μl | 3μl | 4μl | 5μl |
Total | 20μl | 20μl | 30μl | 40μl | 50μl |
质控项目 | 质控标准 |
功能活性检测 | 最适反应温度下,在 20 μl 反应体系中,1 μl 快速内切酶 XhoI 能够在 15 min 内完全消化 1 μg λDNA 。 |
星号活性测试 | 最适反应温度下,将 1 μl 快速内切酶 XhoI 与 1 μg λDNA 共同温育 3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,延时酶切可能出现星号活性。 |
酶切—连接—再酶切检测 | 最适反应温度下,使用 1 μl 快速内切酶 XhoI 消化底物,回收酶切产物。在 22 ℃下使用适量 Fast T4 DNA Ligase 可以将酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。 |
非特异性内切酶活性检测 | 最适反应温度下,使用 1 μl 快速内切酶XhoI 与 1 μg 超螺旋质粒 DNA 共同温育 4 h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,质粒 DNA 仍然处于超螺旋状态。 |
蓝白斑检测 | 将含有单一lacZα 基因的载体以 1 μl XhoI 消化,重新连接后转化入大肠杆菌感受态细胞,涂布在含有对应抗生素、 IPTG 和 X-gal 的 LB 培养基平板上。连接正确的产物会生长出蓝色菌落,而连接错误(即 DNA 末端切口不完整)的产物将得到白色菌落。对于 Reaction系列限制酶而言,白色菌落比例应小于1%。 |
λDNA | ΦX174 | pBR322 | pUC57 | pUC18/19 | SV40 | M13mp18/19 | Adeno2 |
1 | 1 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 6 |
Dam | Dcm | CpG | EcoKI | EcoBI |
无影响 | 无影响 | 序列完全重叠剪切阻断 | 无影响 | 无影响 |
BIOISCO Reaction Buffer |
Thermo Scientific FastDigest Buffer |
NEB CutSmart® Buffer |
Takara QuickCut™Buffer |
|
活性 | 100% | 100% | 100% | 100% |
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