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- CA1090-200ul
- 2025年07月12日
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北京索莱宝科技有限公司
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200ul
支原体清除剂说明书
货号：CA1090
规格：200μL
保存：-20℃，一年（避免反复冻融，建议分装保存。）
注意：1.请在收到货后，将试剂管瞬时离心。
2.产品出现沉淀属正常现象，在分装或使用前须在室温下震荡溶解至澄清透明状，不影响产品的使用效果。
产品说明：
支原体是一种大小仅为 0.2~0.3 μm，无细胞壁，可透过一般过滤膜（0.22~0.45 μm）的原核生物，在细胞培养过程中，支原体感染发生率达到 63%，因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。多篇文献研究表明：当细胞（特别是传代细胞）被支原体污染后，细胞内的 DNA、RNA 及蛋白表达发生改变，而细胞的生长率一般并未发生显著的影响，因而细胞被支原体污染一般难以察觉。
支原体清除剂用于解决因支原体污染而导致细胞污染或状态下降的问题，同时其对于常见的革兰氏阴性和阳性菌也有一定的清除作用，从而确保研究人员的研究结果真实、可信。一般的，本产品只需3天就可以清除细胞内和细胞外的支原体。。
使用说明：
- 建议现配现用，并保持细胞密度在 50～60%。
- 推荐稀释比例为 1:1000。例如 10 mL 的培养基加入 10 μL 支原体清除剂混匀。
- 弃去旧的培养基，用 PBS 将细胞清洗干净，再加入含有支原体清除剂的新鲜培养基，1 天 1 次，
- 若细胞对支原体清除剂敏感，或生长明显被抑制时，可调整稀释比例，如：1:2000或1:3000
- 处理完毕后，加入新鲜培养基，培养基中可添加支原体预防剂预防支原体再次污染。
- 因支原体清除剂本身具有广谱抑菌性，为了降低对细胞的影响，强烈建议不要和其它抗生素同时使用。
- 特异性清除培养基中的支原体；
- 只需要处理3天左右，便可以有效清除支原体；
- 活性成分为多肽类，不会产生耐药性；
- 对细胞几乎无毒性，在 100 多种细胞上进行过验证，包括但不限于 HEK293、Hela、MCF-7、MRC-5、NIH-3T3、CCC-ESF、CHO-S、CHO-K1、CHO-DG44、H295R、HL-60、K562、MDA-MB-231、SP2/0、T47D、BM 和 BV2 等；
- 广谱性，可替代双抗，可以清除常见的革兰氏阴性和阳性菌；
- 可直接加入血清、培养基中，用于清除支原体污染；
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文献和实验网友eming43的经验 支原体的检测． PCR法 原理 该法是通过PCR技术将支原体16srRNA基因特异性扩增，来检测培养细胞中污染的支原体。PCR引物选自16sr RNA基因上的支原体特异片段，此片段与其他细菌的序列无交叉性杂交反应。扩增产物用琼脂糖凝胶电泳，经溴乙啶（EB）染色后在紫外透射仪上进行检测。 u 16sr DNA引物用水稀释至40umol/L。 （1）.正向引物：5’-ACTCCTACGGGAGGCAGCAGTA-3’ （2）.反向
污染测试--支原体 : PCR方法原理： 利用具特殊专一性之primers，经由PCR反应来复制mycoplasma DNA。所用之primers来自mycoplasma之conserved 16S-23S rRNA序列，由于此段spacer之序列依mycoplsma种类不同而不同，因此可依所复制之DNA大小及其restriction fragment大小差异来作侦测与鉴定。 特点：灵敏(e.g. 0.1~1.6 CFU / 5 ul sample) 与快速(一天)。可侦测不易培养
最近看大家常提到支原体污染，就翻了翻书，做了些笔记，现在贴出来和大家分享： 支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。 支原体形态多变，在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。横断面与细胞微绒毛相似，但微绒毛电子密度比支原体小，且中央无颗粒群或中央束。 支原体代谢需固醇
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