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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃避光
- 库存:
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- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- 规格:
50T
货号:BC3780
规格:50T/100T
保存: 按照储存条件保存,保质期1年。
产品内容:
| 名称 | 50T | 100T | Storage |
| 破壁溶液Ⅰ | 25mL | 50mL | 2-8℃ |
| 破壁溶液Ⅱ | 25mL | 50mL | 2-8℃ |
| 裂解液 | 25mL | 50mL | 2-8℃ |
| β-巯基还原剂 | 0.625mL | 1.25mL | 2-8℃,避光 |
| 蛋白酶抑制剂(100×) | 0.25mL | 0.5mL | -20℃,避光 |
| PMSF(100X) | 0.25mL | 0.5mL | -20℃,避光 |
操作步骤(仅供参考):
注:β-巯基还原剂,蛋白酶抑制剂(100×),PMSF(100X)这几个试剂使用前先用掌上离心机进行离心。
- 收集OD600 = 1.0 酵母菌体,4℃,12000rpm离心5min ,弃去上清液。
- 将菌体称重,按照比例(50mg:500 μL)向沉淀中加入500 μL破壁溶液Ⅰ,重悬菌体,冰上孵育5min。
- 4℃,12000rpm离心2min,弃去上清,向沉淀中加入500 μL破壁溶液Ⅱ,重悬菌体,冰上孵育5min。
- 在500 μL的裂解液中加入5 μLPMSF,5 μL蛋白酶抑制剂和12.5 μL β-巯基还原剂;混匀,放置在冰上备用(根据实际用量准备适量裂解液),现用现配。
- 4℃,12000rpm离心2min,弃去上清,向沉淀中加入500 μL上述提前备好的裂解液重悬菌液。室温震荡40min~60min,或者煮沸5min。
- 裂解结束后,4 ℃ ,12000rpm 离心 10min。收集上清用于后续实验。
- 裂解液在低温条件下可能会出现沉淀析出现象,37度水浴加热至沉淀完全溶解再使用。
- β-巯基还原剂低温状态下可能比较粘稠,可恢复室温后使用。
- 提取后的蛋白溶液中含有还原剂,如果要测浓度,请先沉淀蛋白,然后用PBS重新溶解蛋白后再进行测定,否则会影响结果。
- 按照每50 mg湿重加500 μL的破壁溶液和裂解液,菌体的量不能够过多,否则会使的菌体裂解不充分。
- 裂解后的酵母菌蛋白液,应在-80℃的冰箱中保存。
- 裂解液中盐离子浓度较高,必要时可透析除盐后使用。
- 如果提取磷酸化蛋白,需要加入磷酸酶抑制剂。
- 本试剂只能够用于体外实验科研实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果,概不承担责任。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 新鲜血液样品( 200 μl )2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP419) ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头(200 μl ,1ml),1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 涡旋振荡器,台式低温离心机实验准备-试剂盒准备:第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中
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