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- YLKBBIO
- YLK-db0069
- 国产
- 2025年12月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Recombinant Ferrochelatase (FECH)
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
2-8°C不超过一个月，-80°C不超过12个月
- 规格：
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
EPP; FCE; Protoheme Ferrolyase; Protoporphyria; Heme synthase; Protoheme ferro-lyase
- 物种Homo sapiens (Human，人)
- 来源原核表达
- 宿主E.coli
- 内毒素水平<1.0EU/µg(LAL法测定)
- 亚细胞定位线粒体
- 预测分子量45.9kDa
- 实际分子量43kDa(差异分析请参阅说明书)
- 片段与标签Gly55~Leu423 with N-terminal His Tag
- 缓冲液成份磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
- 性状冻干粉
- 纯度> 95%
- 等电点8.6
- 应用Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
- 规格10µg50µg 200µg 1mg 5mg
序列
用法
Reconstitute in 10mM PBS (pH7.4) to a concentration of 0.1-1.0 mg/mL. Do not vortex.
储存
避免反复冻融。2-8°C不超过一个月，-80°C不超过12个月。
稳定性
热稳定性以损失率显示。损失率是由加速降解试验决定，具体方法如下：在37°C孵育48小时，没有显著的降解或者沉淀产生。保质期内，在适当的条件下存储，损失率低于5%。
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文献和实验本月旧帖整理活动专题: T-A克隆技术 大家可以在以下基础上进行整理或对具体问题进行讨论 (1)如何筛选合适的宿主菌株 ◇ 所选的宿主菌株应对所用质粒的抗生素抗性基因敏感。 ◇ 如进行蓝/白斑筛选，宿主菌β-半乳糖苷酶的α-肽编码区应在染色体或附加体上缺失掉（lacZΔΜ15）。TOP10和DH5α都能用于蓝/白斑筛选。 ◇ 要表达重组蛋白，可使用带有可诱导的T7 RNA聚合酶基因的菌株，如BL21（DE3）。 ◇ 使用pGEM载体克隆大片段时（>7-8 kb），经转化
293，CHO-S，DG44和CHO-K1细胞，来源于经筛选转染效率更高的亚细胞系。这些细胞也可用于无血清和限定化学成分培养基。重组蛋白的大规模生产一般在稳定转染的悬浮细胞中进行。这些细胞易于生长到高密度并合成更多蛋白，使用基质珠做为固相支持可以使贴壁细胞悬浮生长。 11转染效率的验证 最有效的验证方式必须是qPCR验证。 荧光观察，使用病毒转染，明白自己病毒的情况，是荧光标记（一般是GFP）还是非荧光标记。质粒转染，可以在载体上添加荧光标记，帮助自己通过荧光观察转染效率。但是荧光并不能完全证明转染
6xHis 标签，也称为多组氨酸标签， His6 标签或 hexa 组氨酸标签, 是一种在转染的细胞中目标蛋白的 C 端或 N 端上由至少 6 个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列。这种标签通常在重组蛋白的纯化中使用，这是因为组氨酸残基的序列可以在特定的缓冲液条件下结合到几种类型固定的离子上（比如镍，钴和铜）从而达到容易检测和纯化 His 标签蛋白的目的。 由于它的相对小的分子量，低的免疫原性，亲水性和在去污剂和其他添加剂存在的情况下的易变性, 因此在天然和变性的条件下，多组氨酸标签
